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審決分類 審判 全部無効 特36条4項詳細な説明の記載不備  C12N
審判 全部無効 1項3号刊行物記載  C12N
審判 全部無効 特120条の4、2項訂正請求(平成8年1月1日以降)  C12N
審判 全部無効 特36条6項1、2号及び3号 請求の範囲の記載不備  C12N
審判 全部無効 2項進歩性  C12N
管理番号 1387805
総通号数 9 
発行国 JP 
公報種別 特許審決公報 
発行日 2022-09-30 
種別 無効の審決 
審判請求日 2020-10-09 
確定日 2022-06-20 
訂正明細書 true 
事件の表示 上記当事者間の特許第６７１８５６１号発明「活性型ＧｃＭＡＦの製造方法」の特許無効審判事件について、次のとおり審決する。 
結論 特許第６７１８５６１号の特許請求の範囲を、訂正請求書に添付された特許請求の範囲のとおり、訂正後の請求項〔１〜３〕について訂正することを認める。 特許第６７１８５６１号の請求項１及び３に記載された発明についての審判請求は成り立たない。 特許第６７１８５６１号の請求項２に記載された発明についての審判請求を却下する。 審判費用は請求人の負担とする。 
理由 第１ 手続の経緯
本件の特許は、平成３０年１２月１４日（優先権主張 平成２９年１２月１５日）を国際出願日とする特願２０１９ー５５９２３０号について、令和２年６月１６日に特許第６７１８５６１号（請求項の数は３。）として特許権の設定登録がされたものである（以下「本件特許」という。）。同年１０月９日に請求人 医療法人 再生未来により、本件特許の請求項１〜３に記載された発明についての特許を無効とすることを求める無効審判が請求された。手続の経緯及び提出された書面は、概略、以下のとおりである。

令和２年１０月 ９日 審判請求書、及び甲第１〜８号証の提出
（同年１０月１２日受付）
同 年１１月１２日 甲第１〜８号証に係る証拠説明書の提出
（同年１１月１６日受付）
令和３年 １月２９日 上申書の提出（被請求人）
（同年２月１日受付）
同 年 ３月１９日 審判事件答弁書、訂正請求書、及び乙第１〜７号証の提出
（同年３月２２日受付）
同 年 ４月３０日 弁駁書の提出、及び甲第６号証の再提出
（同年５月６日受付）
同 年 ７月１５日付け 審理事項通知書（請求人、被請求人）
同 年 同月３０日 口頭審理陳述要領書の提出（被請求人）
（同年８月２日受付）
同 年 ８月１２日付け 口頭審理中止通知書（請求人、被請求人）
同 年 同月１７日 口頭審理陳述要領書（請求人）、及び甲第９〜１１号証の提出
（同年８月１９日受付）
同 年 同月２４日 口頭審尋
同 年 同月２７日付け 書面審理通知書（請求人、被請求人）
同 年 同月３０日 上申書（被請求人）、及び乙第１〜７号証に係る証拠説明書の提出
（同年８月３１日受付）
同 年 ９月２４日 上申書（請求人）、及び甲第１２号証の提出
（同年９月２７日受付）
同 年１０月１３日 上申書（被請求人）、及び乙第８号証の提出
（同年１０月１４日受付）

第２ 訂正請求について
１ 訂正請求の趣旨及び訂正の内容
被請求人は、令和３年３月１９日付け訂正請求書により、本件特許の特許請求の範囲を、訂正請求書に添付した訂正特許請求の範囲のとおり、訂正後の請求項１〜３について訂正することを求めた（以下、令和３年３月１９日付け訂正請求及び訂正特許請求の範囲を、それぞれ「本件訂正」、「本件訂正特許請求の範囲」ともいう。）
本件訂正の内容は以下のとおりである。下線は訂正箇所である。

（１）訂正事項１
特許請求の範囲の請求項１に
「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ発現ベクターを導入したＣＨＯ細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程
を含む、活性型のＧｃ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ（ＧｃＭＡＦ）の製造方法。」
とあるのを、
「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ発現ベクターを導入したＣＨＯ細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程を含み、
糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、
活性型のＧｃ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ（ＧｃＭＡＦ）の製造方法。」
に訂正する。

（２）訂正事項２
特許請求の範囲の請求項２を削除する。

（３）訂正事項３
特許請求の範囲の請求項３に
「ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含む、請求項１又は２に記載の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法。」
とあるのを、
「ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含む、請求項１に記載の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法。」
に訂正する。

２ 訂正の適否
（１）訂正事項１について
ア 訂正の目的
訂正事項１は、本件訂正前の請求項２の「糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、請求項１に記載の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法。」との記載、本件特許の明細書における【００１２】の「本発明の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法は、ＶＤＢＰ発現ベクターを導入した細胞を、無血清培地中で培養する工程を含み、不活性型ＶＤＢＰの糖鎖切断のための酵素処理工程を必要としないことを特徴とする。」との記載、【００２１】の「本発明の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法は、糖鎖切断のための酵素処理工程を必要としないことが大きな特徴のひとつである。」との記載、及び、【００４５】の「以上のとおり、本発明の宿主細胞／無血清培地／浮遊系培養システムを用いた活性型ＧｃＭＡＦの製造方法によると、糖鎖切断のための酵素処理工程を要することなくＯｎｅ−ｓｔｅｐで活性型ＧｃＭＡＦを効率よく合成できることが明らかとなった。」との記載に基づき、訂正前の請求項１に記載の製造方法で含まれる工程を特定し、限定を加えるものであるから、特許法第134条の2第1項ただし書き第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。

イ 新規事項の追加の有無
前記アのとおり、訂正事項１は、本件特許の明細書中の発明の詳細な説明に基づいて導き出される構成であるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第134条の2第9項で準用する同法第126条第5項に適合するものである。

ウ 特許請求の範囲の実質拡張・変更の有無
前記アのとおり、訂正事項１は、訂正前の請求項１に記載の製造方法で含まれる工程を特定し、限定を加えるものであり、発明のカテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第134条の2第9項で準用する同法第126条第6項に適合するものである。

（２）訂正事項２について
ア 訂正の目的
訂正事項２は、訂正前の請求項２の記載を削除するものである。
したがって、訂正事項２は、特許法第134条の2第1項ただし書き第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。

イ 新規事項の追加の有無
訂正事項２は、訂正前の請求項２の記載を削除するものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第134条の2第9項で準用する第126条第5項に適合するものである。

ウ 特許請求の範囲の実質拡張・変更の有無
訂正事項２は、訂正前の請求項２の記載を削除するのみであるから、これらの訂正は、訂正前の請求項２について、発明のカテゴリーを変更するものでもなく、かつ、発明の対象や目的を変更するものとはならない。
したがって、訂正事項２は、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではないため、特許法第134条の2第9項で準用する同法第126条第6項に適合するものである。

（３）訂正事項３について
ア 訂正の目的
訂正事項３は、請求項２の削除に伴い、訂正前の請求項３で引用している請求項を「請求項１又は２に記載の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法。」から、「請求項１に記載の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法。」にするものであり、特許法第134条の2第1項ただし書き第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。

イ 新規事項の追加の有無
前記アのとおり、訂正事項３は、請求項２の削除に伴い、訂正前の請求項３で引用している引用請求項を削減するものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第134条の2第9項で準用する同法第126条第5項に適合するものである。

ウ 特許請求の範囲の実質拡張・変更の有無
前記アのとおり、訂正事項３は、訂正前の請求項３で引用している引用請求項を削減するものであり、発明のカテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第134条の2第9項で準用する同法第126条第6項に適合するものである。

（４）一群の請求項について
訂正前の請求項２及び３は、訂正前の請求項１を直接又は間接的に引用しており、訂正事項１によって記載が訂正される請求項１に連動して訂正されるものである。したがって、訂正前の請求項１〜３は、特許法第134条の2第3項に規定する一群の請求項である。

３ 小括
以上のとおり、本件訂正は、適法なものであるから、本件特許の特許請求の範囲を、訂正請求書に添付した訂正特許請求の範囲のとおり、訂正後の請求項〔１〜３〕について訂正することを認める。

第３ 本件特許の発明
上記のとおり、本件訂正が認められるから、本件特許の発明は、以下に示す本件訂正特許請求の範囲のとおりのものと認められる（以下、請求項の番号によって、訂正前の請求項を「請求項１」、本件訂正後の請求項を「訂正請求項１」などといい、訂正後の請求項１に記載された発明を「訂正発明１」などという。また、訂正後の発明をまとめて「訂正発明」ということがある。）。

【請求項１】
Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ発現ベクターを導入したＣＨＯ細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程を含み、
糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、
活性型のＧｃ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ（ＧｃＭＡＦ）の製造方法。
【請求項２】
（削除）
【請求項３】
ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含む、請求項１に記載の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法。

第４ 請求人の主張及び証拠方法
請求人は、本件特許の特許請求の範囲の請求項１〜３に記載された発明についての特許を無効とする、請求費用は被請求人の負担とする、との審決を求めた。請求人は、無効理由として、以下の１に記載する無効理由１〜４（当審注：無効理由の１〜４の各番号は、審判請求書６〜７頁における「理由の要点」に記載された１〜４（数字は丸付き）に従って整理した。）を主張し、それらの主張を裏付ける証拠として、以下の２に示す甲第１〜１２号証を提出した（以下、本件特許の登録時の特許請求の範囲に記載された発明を請求項の番号によって、「特許発明１」などといい、これらをまとめて「特許発明」ということがある。また、本件特許の願書に添付した明細書を「特許明細書」という。）。

１ 請求人の主張する無効理由の概要

無効理由１（新規性欠如）： 特許発明１〜３は、甲第１号証に記載された発明であり、特許法第29条第1項第3号に該当する。したがって、特許発明１〜３についての特許は、特許法第123条第1項第2号に該当し、無効とすべきである。

無効理由２（進歩性欠如）： 特許発明１〜３についての特許は、以下のａ〜ｅ（当審注：ａ〜ｅの記号は、便宜のために当審が付した。）に示す理由で、特許法第29条第2項の規定に違反してされたものである。したがって、特許発明１〜３についての特許は、同許法第123条第1項第2号に該当し、無効とすべきである。

ａ 特許発明１及び２は、甲第１号証に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
ｂ 特許発明１及び２は、甲第２号証及び甲第１、４〜８号証に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
ｃ 特許発明３は、甲第１号証及び甲第３号証に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
ｄ 特許発明３は、甲第２号証及び甲第１、３〜８号証に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
ｅ 特許発明１及び３は、甲第３号証及び甲第１、４〜８号証に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
（以下、これらのａ〜ｅに示した理由ついて、それぞれ「無効理由２ａ」などという。）

無効理由３（実施可能要件違反）：特許明細書の発明の詳細な説明は、当業者が特許発明１〜３に記載された発明を実施することができる程度に明確かつ十分に記載されたものではなく、特許法第36条第4項1号に規定された要件を満たしていない。したがって、特許発明１〜３に係る発明についての特許は、同法第123条第1項第4号に該当し、無効とすべきである。

無効理由４（サポート要件違反）：特許明細書の記載および本件特許の出願時の技術常識を参酌しても、特許発明１〜３の全範囲にわたって、発明の詳細な説明に開示された内容を拡張ないし一般化できるとは言えず、特許法第36条第6項1号に規定された要件を満たしていない。したがって、特許発明１〜３についての特許は、同法第123条第1項第4号に該当し、無効とすべきである。

２ 請求人が提出した証拠（証拠方法）

甲第１号証： 特表２０１３−５３０１４６号公報
甲第２号証： Journal of Clinical Laboratory Analysis 29: 451-461 (2015)
甲第３号証： 特表平１１−５１１９６２号公報
甲第４号証： 特表２０１６−５２０６４６号公報
甲第５号証： 「Table 1 日本で承認された組換え医薬品・細胞培養医薬品（バイオ後続品を除く）」（国立医薬品食品衛生研究所生物薬品部 ２０１８年２月１２日）
甲第６号証： Glycobiology, vol.19 no.9 pp.936-949, 2009
甲第７号証： 化学と生物 Vol.31, No.3, pp.201-205, 1993 「５．動物細胞工学と糖鎖工学 動物細胞で生産する糖タンパク質の糖鎖構造」
甲第８号証： 「ExpiCHO Expression System USER GUIDE」（Thermo Fisher Scientific ２０１６年１２月２１日）
＜以上、審判請求書とともに提出。＞

甲第９号証： ２０２０年３月１０日（発送日）付の拒絶理由通知書
甲第１０号証： ２０２０年４月２１日付の手続補正書
甲第１１号証： ２０２０年４月２１日付の意見書
＜以上、令和３年８月１７日に提出の口頭審理陳述要領書とともに提出。＞

甲第１２号証： ２０２１年８月２４日の口頭審尋で用いた説明資料（作成日：２０２１年８月２４日、作成者：請求人代理人）
＜以上、令和３年９月２４日に提出の上申書とともに提出。＞

（以下、甲号証は、号証番号に応じて、「甲１」などという。）

第５ 被請求人の主張及び証拠方法
被請求人は、本件審判請求は成り立たない。審判費用は請求人の負担とする、との審決を求め、上記請求人の主張する無効理由は、いずれも理由がないと主張し、主張を裏付ける証拠として、乙第１〜８号証を提出した。

乙第１号証： Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 8539-8543 (1991)
乙第２号証： Anticancer Research, 25, 3689-3696 (2005)
乙第３号証： Clin. Chem. 56, 202-211 (2010)
乙第４号証： Biochemistry 18, 1611-1617 (1979)
乙第５号証： Mol Immunol. 33, 1157-1164 (1996)
乙第６号証： J. Immunol. 152, 5100-5107 (1994)
乙第７号証： Biochim. Biophys. Acta 1804, 909-917 (2010)
＜以上、審判事件答弁書とともに提出。＞

乙第８号証： ２０２１年８月２４日の口頭審尋で用いた説明資料（作成日：２０２１年８月２４日、作成者：被請求人代理人）
＜以上、令和３年１０月１３日に提出の上申書とともに提出。＞

（以下、乙号証は、号証番号に応じて、「乙１」などという。）

第６ 証拠の記載事項
請求人が提出した証拠のうちの甲１〜４には、それぞれ以下の事項が記載されている。なお、下線は、甲３の項目名について付されているもの以外は、当審が付したものである。

１ 甲１の記載事項
発明の名称を「二重特異的融合タンパク質」とした特許文献である甲１には、以下の事項が記載されている。

甲１ア 「【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）組織の損傷細胞に関する標的分子に結合特異性を有する標的化ドメインであって、該分子は生存細胞の細胞内にあり、損傷細胞の細胞外空間に露出されている；および
（ｂ）組織の細胞表面に関する増殖因子受容体に結合特異性を有する活性化ドメインであって、該活性化ドメインが増殖因子受容体にさらされると、組織の再生または生存を調節するように活性化ドメインが増殖因子受容体に結合する：
を含む二重特異的融合タンパク質。
【請求項２】
さらにペプチド半減期モジュレータを含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
・・・
【請求項１７】
半減期モジュレータが非免疫原性のタンパク質である、請求項２〜６のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項１８】
半減期モジュレータがヒト血清アルブミン、アルファ−フェトプロテイン、ビタミンＤ結合タンパク質、トランスサイレチン、単一鎖の抗体Ｆｃドメイン、プロリン−、アラニン−、および／または、セリン−豊富な配列、アルブミン結合ドメイン抗体、それらの変異体、それらの断片、およびそれらの組合せのうちの一からの配列を含む、請求項１７に記載の融合タンパク質。
・・・
【００１５】
いくつかの実施例において、半減期モジュレータは非免疫原性のタンパク質である。半減期モジュレータはヒト血清アルブミン、ヒト血清アルブミンのドメインＩＩＩ、アルファ−フェトプロテイン、ビタミンＤ結合タンパク質、トランスサイレチン抗体Ｆｃドメイン、抗体Ｆｃドメインの単一鎖版、プロリン−、アラニン−、および／または、セリン−豊富な配列、それらの変異体、それらの断片、およびそれらの組合せのうちの一からの配列を含むことができる。例えば、半減期モジュレータは血清アルブミンアミノ酸配列と少なくとも８０％同一である少なくとも１００個の連続したアミノ酸を含む。いくつかの実施形態において、半減期モジュレータは配列番号１０、１２、１４−２９、４５−４９、６５−７１または１０５のいずれか一つに記載されるアミノ酸配列を有する。」

甲１イ 「【０３０９】
いくつかの実施形態において、半減期モジュレータに存在する１個以上のグリコシル化部位のグリコシル化で半減期モジュレータを改質できる。例えば、以下のアミノ酸：アスパラギン、セリン、トレオニンを半減期モジュレータのグリコシル化を改質するために加えるか、または除くことができる。いくつかの実施形態において、二重特異的タンパク質の半減期モジュレータのグリコシル化は二重特異的タンパク質の半減期を調節できる。いくつかの実施形態において、半減期モジュレータ配列は、グリコシル化を減少させるように改質される。そのような改質は、Ａｓｎ（Ｎ）のＧｌｎ（Ｑ）またはＡｌａ（Ａ）による置換、および／または、Ｓｅｒ（Ｓ）のＴｈｒ（Ｔ）またはＡｌａ（Ａ）による置換を含む。
・・・
【０３１２】
いくつかの実施形態において、半減期モジュレータは、ビタミンＤ結合タンパク質（ＶＤＢＰ）アミノ酸配列と少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％同一の少なくとも１００個の連続したアミノ酸を含む。いくつかの実施形態において、ＶＤＢＰのＮ−結合型グリコシル化部位はＮ２８８ＱまたはＮ２８８Ｔ置換で除去される。いくつかの実施形態において、半減期モジュレータは配列番号６６に記載された配列を含む。いくつかの実施形態において、半減期モジュレータ核酸配列は配列番号２１９に記載された配列を含む。」

甲１ウ 「【０３７３】
他の場合では、タンパク質は、Ｓｅｌｅｘｉｓ／ＣＨＯクローン系を使用することで精製された。例示的な発現ベクターはｐＭＰ２０Ｋ（ＳＥＬＥＸＩＳ）であり、例示的細胞株はＣＨＯ−ｋｌ−Ｓ（ＳＥＬＥＸＩＳ）である。ｐＭＰ２０Ｋは一般的に使用された遺伝要素を使用する。発現はヒトのＧＡＰＤプロモーターによって駆動される。Ｍａｔｒｉｘ Ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ＲｅｇｉｏｎまたはＭＡＲ要素といわれる遺伝要素は、染色質の動的組織化を制御し、周囲の染色質の効果から隣接する遺伝子を隔離し、その結果、コピー数依存、位置依存の遺伝子発現を増加させる。ＭＡＲ要素は、組換えタンパクの所望のレベルの発現を示すクローンの分離の確率を改善し、生産の安定性を増加させることを示した。発現プラスミドに加えて、抗生物質耐性プラスミド（ｐＳＶ２−ｎｅｏ、ＳＥＬＥＸＩＳなど）もまた、安定した形質転換体の選択のために、使用された。発現プラスミドは直線化され（例えば、Ｐｖｕｌで）、その後ＱＩＡＱＵＩＣＫ精製（ＱＩＡＧＥＮ）が続いた。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＬＴＸ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）は、ＯｐｔｉＭｅｍＩ（Ｇｉｂｃｏ）におけるＣＨＯ細胞へのトランスフェクションのために使用された。トランスフェクトされた細胞は、１０％ＦＢＳ含有Ｆ１２Ｈａｍｓ培地で２日間選択圧なし、その後４日間の選択圧で回復され、次いで、選択圧ありの無血清培地に変更された。ＨｙＣｌｏｎｅ登録商標（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）は、ＨＴ補完剤（ＧＩＢＣＯ）と共に、ＨＳＡ−融合ＢＢＡに使用される。」

甲１エ 「【０３３５】
二重特異的融合タンパク質の調製
二重特異的タンパク質は液相および固相ペプチド合成および組換えＤＮＡ技術を含む標準的な技術を用いて合成し得る。固相合成のため、配列のＣ−末端アミノ酸は不溶性担体に取り付けられ、残余のアミノ酸は順に結合される。約５０アミノ酸より長いポリペプチドに関しては、より短い領域がこの方法で合成され、続いてより長いポリペプチドを形成するため濃縮され得る。カルボキシル末端の活性化による（例えば、カップリング試薬Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドの使用による）ペプチド結合を形成する方法は当分野で周知である。
・・・
【０３３７】
いったん二重特異的融合タンパク質をコードするＤＮＡを得ると、ＤＮＡは原核生物または真核宿主細胞における発現のためにベクターにクローニングされ得る。そのようなベクターにＤＮＡを組込むための技術は当業者に周知である。そのような発現ベクターの中では、二重特異的融合タンパク質をコードするＤＮＡは、発現に必要なヌクレオチド配列（例えば、適当なプロモーターと必要なら終結シグナル）に動作可能に連結される。プロモーターは、（典型的には５’からコード配列に位置する）、隣接して連結されるコード配列の転写を指示するヌクレオチド配列である。終結シグナルは、翻訳を停止する終止コドンおよび／または転写の終止シグナルであり得る。また、追加の調節要素（例えば、エンハンサー要素）も発現ベクターの中に存在し得る。そのようなベクターは、好ましくは核外遺伝子またはウイルス・ベクターである。好ましくは、発現ベクターはさらに選択への抵抗を与える選択可能なマーカーを含む。これによって、細胞がベクターをその染色体に安定して統合することができ、（順にクローニングされ、細胞株に拡張できる増殖巣を形成できる。さまざまな選択可能なマーカーは当分野で既知であり、例えば、アンピシリン、メトトレキサート、ミコフェノール酸、アミノグルコシドＧ−４１８、ハイグロマイシン、およびプロマイシンへの耐性遺伝子を含む。当業者は、大腸菌、他の細菌性宿主、酵母およびＣＯＳ、ＣＨＯ、ＨｅＬａおよび骨髄腫細胞株などの様々な高等真核細胞を含む、タンパク質の発現のために利用可能は多数の発現系に詳しい。
【０３３８】
宿主細胞は、標準方法を使用することで二重特異的融合タンパク質をコードするＤＮＡを含むベクターで形質転換されるか、またはトランスフェクトされる。宿主細胞における発現はＤＮＡの対応するｍＲＮＡへの転写、続いて二重特異的融合タンパク質を生成するｍＲＮＡの翻訳をもたらす。
【０３３９】
いったん発現されると、二重特異的融合タンパク質は、例えば、硫安沈殿またはアフィニティーカラムクロマトグラフィーなどを含む標準的な手順に従って精製できる。医薬用途において、少なくとも約９０〜９５％の同一性の実質的に純粋な構造が好ましく、９８から９９％以上の同一性が最も好ましい。部分的にまたは望ましい同一性までいったん精製されると、治療上使用されるには、ポリペプチドは実質的にエンドトキシンを含まないものであるべきである。」

甲１オ 「【０３８２】
Ｓｅｌｅｘｉｓ／ＣＨＯ発現系におけるタンパク質の発現とクロマトグラフィーによるその後の精製。
興味のあるタンパク質を発現する安定したＳｅｌｅｘｉｓ ＣＨＯ細胞株は、振盪培養器で５〜８％のＣＯ２、３７℃にて無血清培地で培養された。成長に使用される培地は：１ＬのＥｘ−Ｃｅｌｌ登録商標 ＣＤ ＣＨＯ Ｆｕｓｉｏｎ培地（Ｓｉｇｍａ、１４３６５Ｃ−１０００ＭＬ）、４０ｍＬの２００ｍＭ Ｌ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、２５０３０−０８１）、１０ｍＬの１００Ｘ ＨＴ補完剤（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１１０６７−０３０）であった。細胞の播種密度は０．３〜０．５×１０６細胞／ｍＬであった。いったん２〜４×１０６細胞／ｍＬに達すると、希望の培養液量（６Ｌ）に達するまで、培養物が希釈された。Ｃｅｌｌ Ｂｏｏｓｔ溶液（１ＬのｄｄＨ２Ｏ、３５ｇのＣｅｌｌ Ｂｏｏｓｔ５（ＨｙＣｌｏｎｅ、３０８６５．０１）、２０ｇのＤ−グルコース、ＮａＯＨでｐＨを７．０に調整)は、最終的な大きい培養物に、播種した３〜５日後に（Ｃｅｌｌ Ｂｏｏｓｔの量＝培養物の７−１２％）加えられた。興味のある分泌タンパク質を含む細胞上清が、培養物生存率が９０％より下に下降すると（培養物をその最終容量に希釈した後〜１週間）、すぐに採取された。細胞上清が遠心分離によって採取され、滅菌ろ過された。精製が１週間以内に実施される場合は、上清は４℃で保存され、そうでなければ、上清は−８０℃で保存された。」

２ 甲２の記載事項
「総２５−ヒドロキシビタミンＤの自動競合型タンパク質結合測定法、多施設評価と実用性」との標題の学術文献である甲２には、以下の事項が記載されている。甲２は英文で記載されているため、当審による訳文で記載する。

甲２ア 「ElecsysビタミンD Totalアッセイは、 25-OHD3と25-OHD2の両方を捕捉する組換えVDBP (recVDBP) を用いた競合的タンパク質結合アッセイであり、合計25-OHDを定量的に測定することができる。recVDBPはヒトのアミノ酸配列に基づき、化学的に調整した培地で増殖させた、浮遊培養のヒト胚性腎臓細胞(HEK 293細胞株)で発現される。シグナル生成は電気化学ルミネセンス技術に基づいており、高感度である(20)。この方法の原理を補足図1に示す。必要な試料容量は15μlであり、アッセイに要する時間は27分である。」（４５２頁右欄MATERIALS AND METHODSの第１段落）

３ 甲３の記載事項
発明の名称を「クローン化したビタミンＤ結合タンパク質由来の大食細胞活性化因子」とした特許文献である甲３には、以下の事項が記載されている。

甲３ア 「【特許請求の範囲】
1．ビタミンＤ３結合タンパク質Ｇcタンパク質（Gcタンパク質）をクローン化するためのバキュロウイルスベクターを選択および使用して、ビタミンＤ３結合タンパク質Ｇcタンパク質（Gcタンパク質）をクローン化することから成るビタミンＤ３結合タンパク質（Gcタンパク質）をバキュロウイルスヘクローニングする方法において、該方法が、
（a）免疫スクリーニング法の使用によりヒト肝臓λgt11ライブラリーより全長のGcタンパク質cDNAを単離し、融合していないバキュロウイルスベクターへ挿入し；
（b）ベクターDNAおよび野生型バキュロウイルスDNAで昆虫細胞（SF9）を共形質転換することにより、全長のGcタンパク質cDNAを持つ組換えバキュロウイルスの単離し；および
（c）昆虫細胞において組換えバキュロウイルスを増殖し、更にクローン化したGcタンパク質を精製する、各工程から成る方法。
2．固定したβガラクトシダーゼおよびシアリダーゼとin vitroにおいてクローン化したGcタンパク質を接触し、およびクローン化したマクロファージ活性化因子（GcMAFc）を得ることから成る、の入手を含むクローン化したマクロファージ活性化因子（GcMAFc）の作製方法。」（２頁１行〜１８行）

甲３イ 「用語表
Gcタンパク質 ビタミンD3結合タンパク質
MAF 大食細胞（マクロファージ）活性化因子
GcMAF Gcタンパク質由来大食細胞活性化因子
GcMAFc クローン化されたGcタンパク質由来大食細胞活性化因子
GcドメインIII Gcタンパク質のドメインIII領域
CdMAF クローン化されたGcドメインIII由来大食細胞活性化因子
NagAg 抗原としてのα-N-アセチルガラクトサミニダーゼ
発明の概要
ビタミンD結合タンパク質（Gcタンパク質）およびその小ドメイン（Gcペプチドの約18%の長さで、ドメインIIIとしても知られる）が、バキュロウィルスベクターによってクローン化された。大食細胞活性化因子、GcMAFcおよびCdMAFをそれぞれ産生するために、クローン化されたGcタンパク質およびクローン化されたドメイン（Cd）ペプチドは固定化されたβ-ガラクトシダーゼおよびシアリダーゼで処理された。これらのクローン化された大食細胞活性化因子およびGcMAFは癌、HIV感染および骨粗鬆症治療のために用いられ、さらに免疫化および種痘のアジュバントとして用いられ得る。癌およびHIV感染患者における血清または血漿中のα-N-アセチルガラクトサミニダーゼを検出するための、方法および抗体仲介ELISAキットが開発され、診断および予後指示薬として用いられた。」（６頁１１行〜７頁１行）

甲３ウ 「大食細胞活性化因子の遺伝子クローニング法の説明
A.Gcタンパク質のcDNAの昆虫ウィルス中へのクローン化
ヒトGcタンパク質をコードする全長cDNAが、λgtll中のヒト肝臓cDNAライブラリー（Clontech，Palo Alto，CA）から、Stratagene，La Jolla，CAから入手可能なpico BlueTM immunoscreening kitを用いて単離された。昆虫細胞によるバキュロウィルス発現系は、多角体タンパク質に関するいくつかの事柄の長所を用いている。すなわち、（a）昆虫細胞中でタンパク質は非常に高レベルに発現され、感染サイクルの後期には総細胞タンパク質の半分以上を構成する；（b）タンパク質はウィルスの感染または複製には必要でなく、組み換えベクターはいかなる補助機能も必要としない；（c）多角体遺伝子を持たないウィルスはクローン化された遺伝子を含むウィルスとは異なるプラーク形態を有する；（d）細菌細胞とは異なり、昆虫細胞はクローン化された遺伝子産物を効率的にグリコシル化する。」（１２頁５行〜１７行）

甲３エ 「2）クローン化プラスミドDNAおよび野生型ウィルスDNAの昆虫細胞への感染
Spodoptera frugiperda（Sf9）細胞の一様な層（25cm2の各フラスコ内に2.5×106）が、950μlの感染緩衝液中のクローン化プラスミド（ベクター）DNA（2μg）および野生型（Ac-MNPV）バキュロウィルスDNA（10μg）で共感染された。細胞が4から5日培養された場合、感染上清は組み換えウィルスを含んでいた。
3）組み換えバキュロウィルスの同定
共感染溶解液は104、105または106に希釈され、Sf9細胞上に蒔かれ、4から6日培養された。プラークが良く形成されてから、閉鎖体陰性の細胞が1.3%の割合で同定された。いくつかの組み換えウィルスだと考えられるプラークが単離され、生成のために2回再プラーク化された。純粋な組み換えウィルスプラーククローンが単離された。
B.組み換えバキュロウィルス由来の目的のタンパク質の解析
1）組み換えウィルス溶解液の調製
昆虫細胞Sf9の単層（25cm2のフラスコ内に2.5×106）が組み換えウィルスクローンに感染させられ、5mlのGIBCO serum-free medium（GIBCO Biochemicals，Rockville，MD）または血清ウシビタミンD結合タンパク質の混入を防ぐために0.1%卵アルブミンを加えた培地中で培養された。培地のフラスコは27℃で保温され、感染の兆候を毎日検査された。4から5日後、フラスコから静かに押し出すことによって細胞は回収され、細胞および培地は遠心管に移され、10分間1000×g、4℃で遠心された。組み換えタンパク質産生のために感染を最大にするために、Sf9細胞は100mlのスピナー溶液培養フラスコ中で50ml完全培地で約2×106細胞/mlまで培養された。細胞は回収され、1000×gで10分間遠心され、10の乗数の感染数（MOI）の組み換えウィルスを含む10から20mlの非血清培地に懸濁された。室温で1時間インキュベートした後、感染細胞は100mlの非血清培地を含む200mlのスピナーフラスコに移され、40時間保温された。分泌されたタンパク質の40％以上が目的のタンパク質であった。上清中のタンパク質が単離された。
2）目的のタンパク質の定量化
1レーン当たり20から40μgの総細胞タンパク質を載せたSDSポリアクリルアミドゲルのクマジーブルー染色が、発現されたタンパク質の量を見積もるために使用された。試料には細胞タンパク質が含まれるため、組み換えタンパク質は非感染細胞タンパク質と比較することで容易に検出された。
3）クローン化されたGcタンパク質の、大食細胞活性化因子（GcMAF）への酵素による転換
分子量52000および458アミノ酸残基（図2）を有するクローン化されたGcタンパク質（2μg）は、ビタミンD親和性カラム（Linket al．Anal．Biochem．157:262，1986）によって単離され、固定化したβガラクトシダーゼおよびシアリダーゼで処理された。生じたクローン化大食細胞活性化因子（GcMAFc）は、ネズミおよびヒト大食細胞に加えられ、食作用および過酸化物産生能について試験された。大食細胞を10pg GcMAFc/mlで3時間保温することにより、大食細胞の食作用が5倍に増加し、過酸化物産生能は15倍に増加した。」（１４頁３行〜１５頁１５行）

４ 甲４の記載事項
発明の名称を「Ｇｃ−マクロファージ活性化因子を含む組成物およびその使用」とした特許文献である甲４には、以下の事項が記載されている。

甲４ア 「【００３７】
Ｇｃタンパク質およびＧｃＭＡＦ ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）とも命名されたＧｃタンパク質は、見かけの分子量が５２ｋＤａで、特定のオリゴ糖が結合している血漿タンパク質である。Ｇｃタンパク質は、当業者に公知の任意の方法により血清または血漿から精製できる。高純度のＧｃタンパク質は、２５−ヒドロキシビタミンＤ３−セファロースアフィニティークロマトグラフィーにより血清または血漿から単離できる。Ｇｃタンパク質はまた、アクチンに対するＧｃタンパク質の結合特異性を利用するアクチン−アガロースアフィニティークロマトグラフィーによっても精製できる。
【００３８】
あるいは、Ｇｃタンパク質は、Ｇｃタンパク質またはＧｃタンパク質小ドメイン（ドメインＩＩＩ）をコードする単離されたｃＤＮＡから取得できる。Ｇｃタンパク質およびＧｃドメインＩＩＩのクローニングならびに発現は、本明細書に完全に記載されるように参照により組み込まれる米国特許第６，４１０，２６９号に記載された。そこに記載された方法では、ヒトＧｃタンパク質をコードする全長ｃＤＮＡを単離するためにはバクテリオファージλｇｔ１１（クロンテック社、カリフォルニア州パロアルト）中のヒト肝臓ｃＤＮＡライブラリーを使用し、タンパク質発現には昆虫細胞におけるバキュロウイルス発現系を使用している。しかし、Ｇｃタンパク質またはその活性断片をコードするｃＤＮＡを発現させるには、哺乳動物細胞系が好ましい。好ましくは、発現は、Ｇｃタンパク質またはその活性ドメインが正しくグリコシル化されるように真核細胞中で行われる。当技術分野で公知の任意のこのような細胞系、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＢＨＫ細胞、ヒト胎児腎臓ＨＥＫ２９３細胞および出芽酵母が使用されてもよい。したがって、任意の真核生物発現ベクターが使用でき、それらにはｐＣＩ−ＮＥＯ、ｐＷＥ３、ｐｃＤＮＡ３．１およびｐＣＭ１８２が含まれるが、これらに限定されない。選択された細胞系へのベクターの挿入は、増幅の有無に関わらず、例えば、エレクトロポレーションによって、ＴｒａｎｓＦｅｃｔｉｎなどの脂質トランスフェクションにより、または当業者に公知の任意の化学的方法によって行うことができる。トランスフェクションは一過性のまたは安定な発現をもたらすことができ、両方の形態は所望のＧｃタンパク質またはその断片を得るのに適切である。活性ＭＡＦの前駆体である発現タンパク質は、その後、細胞から抽出するか、または当技術分野で公知の任意の方法によって増殖培地から収集することができる。」

第７ 当審の判断
本件訂正により、請求項２は削除されたので、以下、訂正発明１及び３について検討する。

１ 甲第１〜３号証に記載された発明
（１） 甲１号証に記載された発明
摘記甲１オのとおり、ＣＨＯ細胞は振盪培養器を用いて培養されていることから、甲１において細胞は「浮遊培養」で培養されることが把握できる。そうすると、摘記甲１ア〜オの記載からみて、甲１には以下の発明が記載されている（以下「甲１発明」という。）。
「組織の損傷細胞に関する標的分子に結合特異性を有する標的化ドメイン、組織の細胞表面に関する増殖因子受容体に結合特異性を有する活性化ドメイン、及び、ペプチド半減期モジュレータを含む二重特異的融合タンパク質をコードするＤＮＡを含む発現ベクターでトランスフェクトしたＣＨＯ細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程、及び、ＣＨＯ細胞により産生された二重特異的融合タンパク質のアフィニティーカラムクロマトグラフィーによる精製工程を含む、前記二重特異的融合タンパク質の製造方法。」

（２） 甲２号証に記載された発明
摘記甲２アの記載からみて、甲２には以下の発明が記載されている（以下「甲２発明」という。）。
「組換えビタミンＤ結合タンパク質（ｒｅｃＶＤＢＰ）を発現するヒト胚性腎臓細胞(ＨＥＫ２９３細胞株)を、化学的に調整した培地中で浮遊培養で増殖させる工程を含む、ｒｅｃＶＤＢＰの製造方法。」

（３） 甲３号証に記載された発明
摘記甲３ア〜エの記載からみて、甲３には以下の発明が記載されている（以下「甲３発明」という。）。
「ヒトのＧｃタンパク質（ビタミンＤ３結合タンパク質）をコードする全長ｃＤＮＡをバキュロウイルスベクターに導入し、得られた組換えバキュロウイルスを感染させた昆虫細胞Ｓｆ９を、無血清培地中で単層培養し、前記ヒトＧｃタンパク質を上清中に分泌させ、前記ヒトＧｃタンパク質をビタミンＤ親和性カラムを用いて単離した後、固定化したβガラクトシダーゼ及びシアリダーゼで処理することを含む、大食細胞の食作用を増加させる作用を有する、クローン化されたＧｃタンパク質由来大食細胞活性化因子（ＧｃＭＡＦｃ）の作成方法。」

２ 無効理由１（新規性欠如）及び無効理由２（無効理由２ａ〜２ｅ）（進歩性欠如）について
（１） 甲１発明に対して
ア 訂正発明１について
（ア） 訂正発明１と甲１発明との対比
甲１発明における「二重特異的融合タンパク質」と、訂正発明１における「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ」（ＶＤＢＰ）及び「Ｇｃ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ（ＧｃＭＡＦ）」は、いずれもタンパク質の一種である限りにおいて一致する。そして、甲１発明の製造方法は、二重特異的融合タンパク質を酵素で処理することで糖鎖の切断を行う工程を含むものではない。
そうすると、訂正発明１と甲１発明は、「タンパク質発現ベクターを導入したＣＨＯ細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程を含み、糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、タンパク質の製造方法。」である点で一致し、以下の点で相違する。

＜相違点１＞
訂正発明１では、ＣＨＯ細胞に導入される発現ベクターに係るタンパク質は、「ＶＤＢＰ」であるのに対し、甲１発明では、「組織の損傷細胞に関する標的分子に結合特異性を有する標的化ドメイン、組織の細胞表面に関する増殖因子受容体に結合特異性を有する活性化ドメイン、及び、ペプチド半減期モジュレータを含む二重特異的融合タンパク質」である点。

＜相違点２＞
訂正発明１の製造方法で得られるタンパク質は、「ＧｃＭＡＦ」であるのに対し、訂正発明１の製造方法で得られるタンパク質は、上記「二重特異的融合タンパク質」である点。

＜相違点３＞
訂正発明１の製造方法で得られる上記ＧｃＭＡＦは、「活性型」のもの、すなわちマクロファージ活性化作用を有しているものであるのに対し、甲１発明ではマクロファージ活性化作用を有するものを製造することについて特定がない点。

（イ） 無効理由１（新規性欠如）について
ａ 判断
上記のように、訂正発明１と甲１発明には相違点１〜３が存在するから、訂正発明１は、甲１に記載された発明ではない。

ｂ 請求人の主張について
請求人は、審判請求書において、甲１の【０３１２】にはペプチド半減期モジュレータとしてＶＤＢＰが記載されており、そして、活性型のＧｃＭＡＦを製造することは明示されていないものの、甲１には、ＣＨＯ細胞／無血清培地／浮遊系培養システムを用いてＶＤＢＰを発現することが開示されており、活性型のＧｃＭＡＦを製造することも実質的に開示されている、と主張している（審判請求書１９頁末行〜２０頁１４行）。
しかしながら、摘記甲１アのとおり、甲１において、ＶＤＢＰは、二重特異的融合タンパク質に含まれることが可能なペプチド半減期モジュレータの選択肢の一つとして列挙されているものの１つにすぎず、ペプチド半減期モジュレータとしてＶＤＢＰを実際に使用して、二重特異的融合タンパク質を製造した具体例は記載されてない。さらに、甲１には、ＶＤＢＰ発現ベクターを用いるとＧｃＭＡＦが製造できることについての説明はなされていないし、当該ＧｃＭＡＦとして活性型のものが得られることについての記載もない。
したがって、甲１における記載に基づいて甲１に記載された発明と認定できるものは、上記１（１）に記載した甲１発明のとおりの二重特異的融合タンパク質の製造方法であって、甲１において活性型のＧｃＭＡＦの製造方法が実質的に記載されているとはいえないから、請求人の上記主張を採用することはできない。

また、請求人は、弁駁書において、甲１には本件の特許発明１及び３における工程上の特徴が全て開示されているから、甲１において取得されるＶＤＢＰは、特許明細書の実施例１、３と同じく、活性型ＧｃＭＡＦと認められ、「活性型ＧｃＭＡＦ」であることは甲１に対する相違点ではない、とも主張している（弁駁書２頁末行〜３頁１５行）。しかし、上記のとおり、甲１には、ＶＤＢＰ発現ベクターを用いることや活性型のＧｃＭＡＦを得ることの記載がないから、甲１に特許発明１及び３の工程上の特徴が全て開示されているとはいえず、請求人の上記主張は、その前提を欠くものであり採用することはできない。

（ウ） 無効理由２ａ（進歩性欠如）について
ａ 判断
事案に鑑み、相違点２及び３の検討を優先する。上記のとおり、甲１には、ペプチド半減期モジュレータの１つとしてＶＤＢＰが例示されているにすぎず、ＶＤＢＰ発現ベクターを用いてＧｃＭＡＦを製造することについての説明はなく、まして、当該ＧｃＭＡＦとして活性型のものが得られることについての記載もないから、甲１発明の製造方法において、甲１の記載から、相違点２、３として挙げた訂正発明１の発明特定事項を採用することが当業者に動機付けられるとは認められない。
したがって、相違点１について検討するまでもなく、訂正発明１は、甲１発明及び甲１における記載に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

イ 訂正発明３について
（ア） 訂正発明３と甲１発明との対比
訂正発明１を引用する訂正発明３は、訂正発明１の製造方法について、さらに、ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含むものであり、当該ビタミンＤアフィニティカラムにおける「アフィニティカラム」は、甲１発明における「アフィニティーカラムクロマトグラフィー」に相当する。そうすると、訂正発明３と甲１発明は、「タンパク質発現ベクターを導入したＣＨＯ細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程、及び、アフィニティカラムによる精製工程を含み、糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、タンパク質の製造方法。」である点で一致し、上記ア（ア）に記載した相違点１〜３に加え、以下の点で相違する。

＜相違点４＞
訂正発明３では、精製工程で用いるアフィニティカラムは、「ビタミンＤアフィニティカラム」であるのに対し、甲１発明ではそのような特定がない点。

（イ） 無効理由１（新規性欠如）について
ａ 判断
上記のように、訂正発明３と甲１発明は相違点１〜４が存在するから、訂正発明３は、甲１に記載された発明ではない。

ｂ 請求人の主張について
請求人は、審判請求書において、相違点４に関し、甲１の【０３７３】には発現された融合タンパク質をアフィニティーカラムクロマトグラフィーによって精製することが記載されており、甲１記載のＶＤＢＰを精製するときに、ビタミンＤアフィニティーカラムクロマトグラフィーを用いることは当業者には明らかであるため、ビタミンＤアフィニティーカラムクロマトグラフィーも実質的に開示されている、と主張している（審判請求書２０頁１７行〜２２行）。
しかしながら、上記１（１）のとおり、甲１発明の製造方法においてＣＨＯ細胞が産生するのは、標的化ドメイン、活性化ドメイン及びペプチド半減期モジュレータを含む二重特異的融合タンパク質であってＶＤＢＰではないから、甲１発明の精製工程において「ビタミンＤアフィニティカラム」を用いることが当業者にとって明らかとはいえない。
したがって、請求人の上記主張を採用することはできない。

（ウ） 無効理由２ｃ（進歩性欠如）について
ａ 判断
甲１発明において、相違点２及び３として挙げた発明特定事項を採用することが当業者に動機付けられるとは認められないので、相違点１及び４について検討するまでもなく、訂正発明３は、甲１発明及び甲１における記載に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

（２） 甲２発明に対して
ア 訂正発明１について
（ア） 訂正発明１と甲２発明との対比
甲２発明の「組換えビタミンＤ結合タンパク質（ｒｅｃＶＤＢＰ）」は、訂正発明１における「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ」（ＶＤＢＰ）の１種であり、ＶＤＢＰは「ＧｃＭＡＦ」とも称することが当業者には知られている。また、甲２発明の「化学的に調整した培地」は、化学物質を用いて調整された培地であって血清を含んでいないものと理解され、訂正発明１の「無血清培地」に相当する。そして、甲２発明の製造方法は、ｒｅｃＶＤＢＰを酵素で処理することで糖鎖の切断を行う工程を含むものではない。そうすると、訂正発明１と甲２発明は、「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＤＢＰ）発現ベクターを導入した細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程を含み、糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、ＧｃＭＡＦの製造方法。」である点で一致し、以下の点で相違する。

＜相違点５＞
訂正発明１では、発現ベクターを導入した細胞が「ＣＨＯ細胞」であるのに対し、甲２発明では「ヒト胚性腎臓細胞(ＨＥＫ２９３細胞株)」である点。

＜相違点６＞
訂正発明１は、「活性型のＧｃＭＡＦ」の製造方法であるのに対し、甲２発明は「ＧｃＭＡＦ」の製造方法である点。

（イ） 無効理由２ｂ（進歩性欠如）について
ａ 判断
標題を「総２５−ヒドロキシビタミンＤの自動競合型タンパク質結合測定法、多施設評価と実用性」とする学術文献である甲２は、組換えビタミンＤ結合タンパク質（ｒｅｃＶＤＢＰ）を用いた２５−ヒドロキシビタミンＤの測定方法について記載するものである。
甲２には、ｒｅｃＶＤＢＰの製造に使用する細胞として、ＨＥＫ２９３細胞株の代わりにＣＨＯ細胞を用いることについての記載や示唆は何らない。また、摘記甲２アのとおり、ＨＥＫ２９３細胞株を用いて製造されるｒｅｃＶＤＢＰがマクロファージ活性化作用を有すること、すなわち活性型でＧｃＭＡＦであることについても何ら記載されていない。そして、甲５〜８の記載を参照しても、甲２発明のｒｅｃＶＤＢＰは２５−ヒドロキシビタミンＤの測定方法において使用されるものであることから、ｒｅｃＶＤＢＰがマクロファージ活性化作用を有することは一般的には確認されないといえる。
してみると、甲２の記載からは、本件特許の優先日前における周知技術をふまえても、当業者は、甲２発明においてＨＥＫ２９３細胞株に替えてＣＨＯ細胞を採用することを動機付けられるとはいえないし、甲２発明の製造方法により、活性型のＧｃＭＡＦが製造されることを当業者が容易に認識できるものとも認められない。
したがって、訂正発明１は、甲２発明、甲１及び甲４における記載、並びに、甲５〜８によって示される周知技術に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

ｂ 請求人の主張について
請求人は、審判請求書及び弁駁書において、甲２発明との相違点であるＣＨＯ細胞に関し、甲１及び甲４には、ＶＤＢＰ、あるいはこれと同義であるＧｃタンパク質をＣＨＯ細胞により生産することが記載されており、また、そもそも、医薬品として使用するための組換えタンパク質を製造する際にＣＨＯ細胞を用いることは、甲５〜８における記載のとおり周知の技術であるから、甲２発明において、宿主細胞としてＣＨＯ細胞を用いることは、当業者であれば容易に想到できることである、と主張している（審判請求書２１頁下から２行〜２３頁６行、弁駁書７頁５行〜１２行）。
しかしながら、甲１及び甲４はいずれも、２５−ヒドロキシビタミンＤなどの測定や検出に用いられるＶＤＢＰを、ＣＨＯ細胞を用いて製造することについて具体的に開示するものではないし、また、上記のとおり、甲２には、ＨＥＫ２９３細胞株の代わりにＣＨＯ細胞を用いることについての記載や示唆は何らないから、二重特異的融合タンパク質をＣＨＯ細胞で産生させることについての説明のある甲１や、Ｇｃタンパク質（ＶＤＢＰ）がＣＨＯ細胞等の細胞系で産生可能なことの説明のある甲４を参照しても、甲２発明においてＨＥＫ２９３細胞株に替えてＣＨＯ細胞を採用することが、甲１及び甲４の記載から当業者にとって容易に想到できたとはいえない。
また、甲５〜８によって示される周知技術とは、医薬品として使用するための組換えタンパク質の製造についてのものであるところ、甲２発明の製造方法で得られるＶＤＢＰは、２５−ヒドロキシビタミンＤの測定方法で用いられるものであり、これを医薬品として用いることについては、甲２には何ら記載がない。さらに、甲５〜８にはＶＤＢＰに関する記載も一切ないので、甲５〜８に記載された医薬品の製造に係る周知技術を甲２発明の製造方法に適用することが、当業者にとって容易に想到できたともいえない。
したがって、請求人の上記主張を採用することはできない。

イ 訂正発明３について
（ア） 訂正発明３と甲２発明との対比
訂正発明１を引用する訂正発明３は、訂正発明１の製造方法について、さらに、ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含むものであるから、訂正発明３と甲２発明は、「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＤＢＰ）発現ベクターを導入した細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程を含み、糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、ＧｃＭＡＦの製造方法。」である点で一致し、上記ア（ア）に記載した相違点５及び６に加え、以下の点で相違する。

＜相違点７＞
訂正発明３では、「ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程」を含むのに対し、甲２発明ではそのような特定がない点。

（イ） 無効理由２ｄ（進歩性欠如）について
ａ 判断
訂正発明３が引用する訂正発明１について、甲２発明、甲１及び甲４における記載、並びに、甲５〜８によって示される周知技術に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえないことは、上記ア（イ）ａに記載したとおりであるから、相違点７について検討するまでもなく、訂正発明３についても、訂正発明１と同様の理由により、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

（３） 甲３発明に対して
ア 訂正発明１について
（ア） 訂正発明１と甲３発明との対比
甲３発明の「ヒトのＧｃタンパク質（ビタミンＤ３結合タンパク質）」及び「クローン化されたＧｃタンパク質由来大食細胞活性化因子（ＧｃＭＡＦｃ）」は、訂正発明１における、ＧｃＭＡＦとも称される「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ」（ＶＤＢＰ）の１種である。また、甲３発明の「大食細胞」は、訂正発明１における「マクロファージ」に相当し、甲３発明におけるＧｃＭＡＦｃが有する「大食細胞の食作用を増加させる作用」とは、マクロファージを活性化する作用と理解される。そうすると、訂正発明１と甲３発明は、「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＤＢＰ）発現ベクターを導入した細胞を、無血清培地中で培養する工程を含む、活性型のＧｃＭＡＦの製造方法。」である点で一致し、以下の点で相違する。

＜相違点８＞
訂正発明１では、発現ベクターを導入した細胞が「ＣＨＯ細胞」であるのに対し、甲３発明では「昆虫細胞Ｓｆ９」である点。

＜相違点９＞
訂正発明１の製造方法は、糖鎖切断のための酵素処理工程を含まないものであるのに対し、甲３発明の製造方法は、糖鎖切断のための酵素処理工程である「固定化したβガラクトシダーゼ及びシアリダーゼで処理すること」を含むものである点。

（イ） 無効理由２ｅ（進歩性欠如）について
ａ 判断
甲３には、ＶＤＢＰ発現ベクターを導入する細胞として、昆虫細胞と同様にＣＨＯ細胞が使用できることは記載も示唆もされてない。また、ＣＨＯ細胞を用いてＶＤＢＰを産生させる場合に、βガラクトシダーゼ及びシアリダーゼのような酵素による糖鎖切断処理を行わずとも活性型のＧｃＭＡＦが得られることについても、記載も示唆もなされていない。
一方、摘記事項甲１ア〜オのとおり、甲１には二重特異的融合タンパク質をＣＨＯ細胞で産生させることについての説明が、また、摘記事項甲４アのとおり、甲４にはＶＤＢＰはＣＨＯ細胞等の細胞系を用いて産生可能なことについての説明がそれぞれ記載されているものの、甲１及び甲４のいずれにも、糖鎖切断のための酵素処理工程を要することなく活性型のＧｃＭＡＦが得られることや活性型のＧｃＭＡＦを製造することについての記載や示唆は何らない。
また、甲５〜８によって示されるように、医薬品として使用するための組換えタンパク質を製造する際にＣＨＯ細胞を用いることが、本件特許の優先日前における周知技術であったとしても、甲３発明において昆虫細胞Ｓｆ９に替えてＣＨＯ細胞を採用した場合に、βガラクトシダーゼ及びシアリダーゼのような酵素による糖鎖切断処理を行わずとも活性型のＧｃＭＡＦを得られることが、当業者にとって自明であったとはいえない。
したがって、訂正発明１は、甲３発明、甲１及び甲４における記載、並びに、甲５〜８によって示される周知技術に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

ｂ 請求人の主張について
請求人は、審判請求書において、甲６における９４２頁左欄「Ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ」の第２段落には、ＣＨＯ細胞が、シアル酸転移酵素とガラクトース転移酵素を欠損していることが記載されており、よって、ＣＨＯ細胞内でビタミンＤ結合タンパク質にシアル酸とガラクトースが付加されず、その結果としてＧａｌＮＡＣのみが結合した活性型ＧｃＭＡＦが産生されることは、当業者が容易に予想できることである、と主張している（審判請求書２３頁下から６行〜下から２行）。
しかしながら、甲３にはＣＨＯ細胞に関する記載がないことから、甲３の記載に接した当業者が甲６の上記記載に着目するとはいえないし、上記記載から直ちにＣＨＯ細胞の使用により糖鎖切断のための処理工程が不要であることを当業者が認識し得るとも認められない。
したがって、請求人の上記主張を採用することはできない。

イ 訂正発明３について
（ア） 訂正発明３と甲３発明との対比
訂正発明１を引用する訂正発明３は、訂正発明１の製造方法について、さらに、ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含むものであり、甲３発明においてヒトＧｃタンパク質の単離に用いている「ビタミンＤ親和性カラム」は、訂正発明３における「ビタミンＤアフィニティカラム」に相当する。そうすると、訂正発明３と甲３発明は、「Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＤＢＰ）発現ベクターを導入した細胞を、無血清培地中で培養する工程、及び、ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含む、活性型のＧｃＭＡＦの製造方法。」である点で一致し、上記ア（ア）に記載した相違点８及び９で相違する。

（イ） 無効理由２ｅ（進歩性欠如）について
ａ 判断
訂正発明３が引用する訂正発明１について、甲３発明、甲１及び甲４における記載、並びに、甲５〜８によって示される周知技術に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえないことは、上記ア（イ）ａに記載したとおりであるから、訂正発明３についても、訂正発明１と同様の理由により、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

（４） 小括
以上に述べたとおりであるから、訂正発明１及び３についての無効理由１及び２は、理由がない。

３ 無効理由３（実施可能要件違反）及び無効理由４（サポート要件違反）について
（１） 特許明細書の記載事項
特許明細書には、以下の記載がある。なお、下線は、実施例における４．の見出しについて付されているもの以外は、当審が付したものである。

ア 「【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このような状況の中、本発明は、より簡便、かつ収率の高い活性型ＧｃＭＡＦの製造方法を提供することを目的とする。」

イ 「【００１２】
＜活性型ＧｃＭＡＦの製造方法＞
本発明の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法は、ＶＤＢＰ発現ベクターを導入した細胞を、無血清培地中で培養する工程を含み、不活性型ＶＤＢＰの糖鎖切断のための酵素処理工程を必要としないことを特徴とする。
【００１３】
本発明の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法は、血漿や血清からＧｃグロブリンを精製して活性型ＧｃＭＡＦを製造するのではなく、ＶＤＢＰ発現ベクターを導入した細胞を無血清培地中で培養することにより、複数の工程を要することなく簡便に活性型ＧｃＭＡＦを製造できるという方法である。
【００１４】
本発明においてＶＤＢＰは、ビタミンＤ結合タンパク質（ＶＤＢＰ；Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ）のことであり、Ｇｃグロブリン、Ｇｃタンパク質ともよばれ、糖鎖構造の異なる３種類のサブタイプ（１ｆ、１ｓ、２）を含む。ＶＤＢＰにおけるいずれのサブタイプにおいても、糖鎖の中心であるＮ−アセチルガラクトサミンにガラクトースがＯ−グリコシド結合している共通の構造を有する。１ｆ型サブタイプでは、ＧａｌＮＡｃにＧａｌａｃｔｏｓｅとＳｉａｌｉｃ ａｃｉｄが結合した３糖がＯ型ｌｉｎｋで結合しており（図１参照）、１ｓ型サブタイプでは、ＧａｌＮＡｃにＧａｌａｃｔｏｓｅとα−Ｍａｎｎｏｓｅが結合した３糖がＯ型ｌｉｎｋで結合しており、２型サブタイプでは、ＧａｌＮＡｃにＧａｌａｃｔｏｓｅが結合した２糖がＯ型ｌｉｎｋで結合しているＶＤＢＰが本発明に含まれる。また、本発明におけるＶＤＢＰは、動物由来であり、好ましくは哺乳類由来であり、例えば、ヒト、ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、イヌ、ネコ、ラビット、マウス、ラット等由来のものが挙げられ、中でもヒト由来のものがより好ましい。
【００１５】
本発明におけるＶＤＢＰ発現ベクターは、遺伝子組換え技術を用いて人工的にＶＤＢＰをコードする核酸を、適切な発現ベクターに組込んだものである。本発明の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法によると、上記発現ベクターを、適切な宿主細胞に発現させ、適切な培養条件で培養することにより、不活性型であるＶＤＢＰの糖鎖切断のための酵素処理をすることなく、活性型ＧｃＭＡＦを効率よく製造することができる。なお、ＶＤＢＰのアミノ酸配列、核酸配列は公知であり、ＧｅｎＢａｎｋ等のデータベースに登録されている配列情報を利用することができる。
【００１６】
本発明におけるＶＤＢＰ発現ベクターとしては、ＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２のいずれのサブタイプをコードする核酸を組み込んだ発現ベクターであってもよいが、中でもＶＤＢＰ１ｆをコードする核酸を組み込んだＶＤＢＰ１ｆ発現ベクター及びＶＤＢＰ１ｓをコードする核酸を組み込んだＶＤＢＰ１ｓ発現ベクターが好ましく、ＶＤＢＰ１ｆ発現ベクターがより好ましい。ＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２をコードする核酸の配列を、それぞれ配列番号１、配列番号２、配列番号３として配列表に記載した。また、ＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２のそれぞれのアミノ酸配列を、配列番号４、配列番号５、配列番号６として記載した。さらに、ＶＤＢＰ発現ベクターに組込む核酸配列としては、翻訳活性を最適化した配列が好ましく、ＶＤＢＰ１ｆの最適化核酸配列を配列番号７、この配列に対応するアミノ酸配列を配列番号８として記載した。ＶＤＢＰ１ｓの最適化核酸配列を配列番号１０、この配列に対応するアミノ酸配列を配列番号１１として記載した。ＶＤＢＰ２の最適化核酸配列を配列番号１２、この配列に対応するアミノ酸配列を配列番号１３として記載した。また、Ｈｉｓタグを付与したＶＤＢＰ１ｆの最適化核酸配列を配列番号９、Ｈｉｓタグを付与したＶＤＢＰ１ｓの最適化核酸配列を配列番号１４、Ｈｉｓタグを付与したＶＤＢＰ２の最適化核酸配列を配列番号１５として記載した。として記載した。」

ウ 「【実施例】
【００２５】
以下の実施例にて本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。
・・・
【００４０】
４．ＣＨＯ細胞／無血清培地／浮遊系培養システムを用いた活性型ＧｃＭＡＦサブタイプ（１ｆ、１ｓ、２型）のＯｎｅ−ｓｔｅｐ合成方法
ＥｘｐｉＣＨＯ（商標）（Ｇｉｂｃｏ（商標））細胞にＨｕｍａｎ ＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓまたはＶＤＢＰ２発現ベクターを導入し、無血清培地（ＥｘｐｉＣＨＯ（商標） Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｍｅｄｉｕｍ、Ｇｉｂｃｏ（商標））を用いて浮遊系で培養した。培養方法はＧｉｂｃｏ（商標） ＥｘｐｉＣＨＯ（商標） Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍのＰｒｏｃｏｔｏｌに従い、Ｈｓ ＧｃＭＡＦ−Ｇｃ１ｓまたはＨｓ ＧｃＭＡＦ−Ｇｃ２−Ｈｉｓｔａｇは１５μｇ用いた。
【００４１】
８日間の培養後、細胞上清をＨｉｓ−Ｔｒａｐ ｃｏｌｕｍｎ（ＧＥ ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社製）にかけ、トラップされたタンパク質を分離し、５０ｍＭ Ｓｏｄｉｕｍ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ｐＨ７．０）緩衝液を用いて透析した。透析後のサンプルをＳＤＳＰＡＧＥにより分離した。５μｇのＶＤＢＰに、１ｍＵシアリダーゼ（Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｄａｓｅ）及び１ｍＵガラクトシダーゼ（β−Ｄ−Ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ）処理（３７℃，３ｈ）を行った。上記酵素処理サンプルと酵素未処理サンプルに分け、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにかけ、抗ＶＤＢＰ抗体、ＧａｌＮＡｃに反応するレクチンブロット（ビオチン標識ＨＰＡレクチン；Ｂｉｏｔｉｎ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＨＰＡ ｌｅｃｔｉｎ）で糖鎖構造を解析した。なお、１ｆ型は「２．ＣＨＯ細胞／無血清培地／浮遊系培養システムを用いた活性型ＧｃＭＡＦのＯｎｅ−ｓｔｅｐ合成方法」に記載の方法で合成し、Ｖｉｔ．Ｄアフィ二ティーカラム（２５（ＯＨ）Ｄ３ ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ−６Ｂ）処理したサンプルを用いた。その結果、１ｓ型、１ｆ型では酵素処理していないサンプルもＨＰＡレクチンに反応することから、本発明の無血清培地／浮遊系培養システムを用いると、上記酵素処理をしなくても、活性型ＧｃＭＡＦが得られることが示された。さらに、酵素処理してもＨＰＡレクチンに反応するＶＤＢＰ量が増加しないことから、本発明の無血清培地／浮遊系培養システムを用いると、ほぼ全てのＶＤＢＰが活性型ＧｃＭＡＦとして得られることが示された（図６）。
【００４２】
また、上記透析後のＶＤＢＰサンプルをＨｉＰｒｅｐ Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ３００ｃｏｌｕｍｎにかけ、得られたサンプルをＶｉｔ．Ｄアフィ二ティーカラム（２５（ＯＨ）Ｄ３ ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ−６Ｂ）にかけてＶＤＢＰを精製した。結合バッファーとして５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１５ｍＭ ＥＤＴＡ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−１００（ｐＨ７．４）、溶出バッファーとして、６Ｍ Ｇｕａｎｉｄｉｎｅ ＨＣｌを用いた。得られたサンプルを１０ｍＭ Ｓｏｄｉｕｍ ｐｈｏｓｐｈａｔｅで透析後にＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ＣＢＢ染色を行った。Ｖｉｔ．Ｄアフィ二ティーカラム精製により、ＶＤＢＰが単一バンドとして精製されること、すなわち、６０ｋＤａ付近のバンドと分離できることが示された（図８）。」

エ 「【図６】

」

（２） 請求人の主張の具体的内容
請求人は、無効理由３及び４について、以下のとおり主張している（審判請求書２６頁下から７行〜２７頁１７行）。
特許発明は、Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＤＢＰ）として任意のサブタイプを用いる方法を包含しており、ＶＤＢＰのサブタイプとして、特許明細書【００１４】にはＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓ、およびＶＤＢＰ２が挙げられている。そして、特許明細書【０００６】によれば、特許発明が解決しようとする課題は、より簡便、かつ収率の高い活性化ＧｃＭＡＦの製造方法を提供することである。
しかしながら、以下のとおり、特許発明は、発明の詳細な説明において発明の課題が解決できることを当業者が認識できるように記載された範囲を超えるものであるから、特許発明はサポート要件を充足しない。また、特許明細書及び本願出願時の技術常識からみて、発明の詳細な説明は、特許発明を当業者が実施することができる程度に明確かつ十分に記載したものであるとはいえないから、特許発明は実施可能要件を充足しない。

（主張１） 特許明細書【００４０】〜【００４２】及び図６では、ＶＤＢＰ２は、ＣＨＯ細胞により無血清培地を用いた浮遊系培養システムで発現されてもＨＰＡレクチンに反応せず、活性型ＧｃＭＡＦが得られていないことが示されており、ＶＤＢＰ２を用いた場合には上記課題を解決できているとはいえない。

（主張２） 特許明細書【００３１】には、ＶＤＢＰ１ｆを発現させたときに、活性型ＧｃＭＡＦの発現レベルが高いと記載されているが、ＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２の発現レベルは示されておらず、そして、組換えタンパク質の発現量が、そのサブタイプのアミノ酸配列や三次元構造の影響を受けることは当業者の技術常識であるから、ＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２において、ＶＤＢＰ１ｆと同様の発現量を達成できることは自明とはいえない。

（３） 当審の判断
ア 主張１について
摘記アのとおり特許明細書の【０００６】に「このような状況の中、本発明は、より簡便、かつ収率の高い活性型ＧｃＭＡＦの製造方法を提供することを目的とする。」と記載されていることから、訂正発明が解決しようとする課題は、「より簡便、かつ収率の高い活性型ＧｃＭＡＦの製造方法を提供すること」であると認められる。
摘記イのとおり特許明細書の【００１４】には、本件の特許発明においてＶＤＢＰは、糖鎖構造の異なる３種類のサブタイプ（１ｆ、１ｓ、２）を含み、いずれのサブタイプも、糖鎖の中心であるＮ−アセチルガラクトサミンにガラクトースがＯ−グリコシド結合している共通の構造を有しており、１ｆ型サブタイプでは、ＧａｌＮＡｃにＧａｌａｃｔｏｓｅとＳｉａｌｉｃ ａｃｉｄが結合した３糖がＯ型ｌｉｎｋで結合しており、１ｓ型サブタイプでは、ＧａｌＮＡｃにＧａｌａｃｔｏｓｅとα−Ｍａｎｎｏｓｅが結合した３糖がＯ型ｌｉｎｋで結合しており、２型サブタイプでは、ＧａｌＮＡｃにＧａｌａｃｔｏｓｅが結合した２糖がＯ型ｌｉｎｋで結合している、との説明が記載されている。
また、摘記イのとおり特許明細書の【００１６】及び配列表には、ＶＤＢＰ発現ベクターに含まれるＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２をコードする核酸の配列が、それぞれ配列番号１、配列番号２、配列番号３として、また、ＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２のそれぞれのアミノ酸配列が、それぞれ配列番号４、配列番号５、配列番号６として記載されている。
そして、摘記ウ及びエのとおり特許明細書の実施例において、ＥｘｐｉＣＨＯ細胞にＨｕｍａｎ ＶＤＢＰ１ｆ、ＶＤＢＰ１ｓ又はＶＤＢＰ２発現ベクターを導入し、無血清培地を用いて浮遊系で培養して得られた細胞上清からタンパク質を分離した後、ＧａｌＮＡｃに反応するレクチンブロット（ビオチン標識ＨＰＡレクチン；Ｂｉｏｔｉｎ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＨＰＡ ｌｅｃｔｉｎ）で糖鎖構造を解析した結果について、
「その結果、１ｓ型、１ｆ型では酵素処理していないサンプルもＨＰＡレクチンに反応することから、本発明の無血清培地／浮遊系培養システムを用いると、上記酵素処理をしなくても、活性型ＧｃＭＡＦが得られることが示された。さらに、酵素処理してもＨＰＡレクチンに反応するＶＤＢＰ量が増加しないことから、本発明の無血清培地／浮遊系培養システムを用いると、ほぼ全てのＶＤＢＰが活性型ＧｃＭＡＦとして得られることが示された（図６）。」
と記載されている（【００４０】、【００４１】、図６）。

ここで、実施例におけるＧａｌＮＡｃに反応するＨＰＡレクチンを用いたレクチンブロットの結果は、タンパク質にＨＰＡレクチンと反応できるＧａｌＮＡｃが存在するか否かを示しているにすぎず、ＨＰＡレクチンと反応できるＧａｌＮＡｃが検出されなかったからといって、活性型ＧａｌＮＡｃが得られていないと断定することはできない。
そして、特許明細書においても、ＶＤＢＰ２を使用した場合には活性型のＧｃＭＡＦが得られないということを結論づけてはいないし、請求人もＶＤＢＰ２を使用した場合にはマクロファージ活性化作用が得られないことを具体的に示しているわけでもない。なお、付言すると、被請求人が提出した審判事件答弁書においても、実際に、ＣＨＯ細胞から得られたＶＤＢＰ２はマクロファージ活性化能を示し、活性型のＧｃＭＡＦであることが示されており（審判事件答弁書２４頁３行〜末行）、また、実際に、特許明細書の【００３１】と同様の方法で調製したＶＤＢＰ１ｓ及びＶＤＢＰ２の発現量はそれぞれ１．４５、１．６０（mg／20mL culture）となることが示されているところである（審判事件答弁書２５頁９行〜２７頁９行）。

また、上記のとおり、特許明細書の実施例において、ＣＨＯ細胞にＶＤＢＰ２発現ベクターを導入し、無血清培地を用いて浮遊系で培養して得られた細胞上清からＶＤＢＰ２を得たことが具体的に記載されており、特許明細書の発明の詳細な説明の記載をふまえて、当業者が、当該ＶＤＢＰ２がマクロファージ活性化作用を有することを試験して、活性型のＧｃＭＡＦであることを確認するのに格別の困難はない。したがって、本願出願時の技術常識をふまえると、特許明細書の発明の詳細な説明の記載から、ＶＤＢＰ２の場合についてもＶＤＢＰ１ｆ及びＶＤＢＰ１１ｓの場合と同様に、当業者は訂正発明の製造方法を過度の試行錯誤を要することなく実施することができたといえる。

イ 主張２について
上記アでも記載したとおり、特許明細書より認識できる特許発明が解決しようとする課題は、「より簡便、かつ収率の高い活性型ＧｃＭＡＦの製造方法を提供すること」であって、活性型ＧｃＭＡＦの発現レベルを高めることは、特許発明が解決しようとする課題ではない。
そして、細胞から回収したタンパク質について、従前行っていた酵素処理工程を要しなければ、酵素処理工程を採用しない分、製造方法は簡便なものとなり、また、酵素処理工程による収率の低減が回避される結果、収率が高まることは、当業者にとって自明の技術的事項である。してみると、特許明細書の記載は、ＶＤＢＰ１ｓ及びＶＤＢＰ２の場合についても上記の課題を解決できることを、当業者が認識できたものといえる。

また、上記のとおり、特許明細書の実施例において、ＣＨＯ細胞にＶＤＢＰ１ｓ発現ベクター又はＶＤＢＰ２発現ベクターを導入し、無血清培地を用いて浮遊系で培養して得られた細胞上清からＶＤＢＰ１ｓ、ＶＤＢＰ２を得たことが具体的に記載されている。そうすると、発明の詳細な説明は、ＶＤＢＰ１ｓ及びＶＤＢＰ２の場合についてもＶＤＢＰ１ｆの場合と同様に、訂正発明の製造方法を過度の試行錯誤を要することなく当業者が実施することができる程度に明確かつ十分に記載されているといえる。


（４） 小括
以上に述べたとおりであるから、訂正発明１及び３についての無効理由３及び４は、理由がない。

第８ むすび
以上のとおり、本件訂正後の請求項１、３に記載された発明の特許は、請求人が主張する理由のいずれによっても無効とすることはできない。
本件特許の請求項２は、訂正により削除され、当該請求項に対して請求人がした審判の請求はその対象が存在しないものになったため、特許法第135条の規定により、却下する。
審判に関する費用については、特許法第169条第2項において準用する民事訴訟法第61条の規定により、請求人の負担とする。
よって、結論のとおり、審決する。
 
別掲 （行政事件訴訟法第４６条に基づく教示） この審決に対する訴えは、この審決の謄本の送達があった日から３０日（附加期間がある場合は、その日数を附加します。）以内に、この審決に係る相手方当事者を被告として、提起することができます。
 
発明の名称 （５７）【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ発現ベクターを導入したＣＨＯ細胞を、無血清培地中で浮遊培養する工程を含み、
糖鎖切断のための酵素処理工程を含まない、
活性型のＧｃ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ（ＧｃＭＡＦ）の製造方法。
【請求項２】
（削除）
【請求項３】
ビタミンＤアフィニティカラムによる精製工程を含む、請求項１に記載の活性型ＧｃＭＡＦの製造方法。
 
訂正の要旨 審決（決定）の【理由】欄参照
審理終結日 2022-04-19 
結審通知日 2022-04-22 
審決日 2022-05-10 
出願番号 P2019-559230
審決分類 P 1 113・ 121- YAA (C12N)
P 1 113・ 832- YAA (C12N)
P 1 113・ 536- YAA (C12N)
P 1 113・ 113- YAA (C12N)
P 1 113・ 537- YAA (C12N)
最終処分 02   不成立
特許庁審判長 福井 悟
特許庁審判官 伊藤 良子
森井 隆信
登録日 2020-06-16 
登録番号 6718561
発明の名称 活性型ＧｃＭＡＦの製造方法  
代理人 特許業務法人 安富国際特許事務所  
代理人 特許業務法人 津国  
代理人 弁護士法人 北浜法律事務所  
代理人 特許業務法人 津国  
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