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審決分類 審判 全部申し立て 2項進歩性  G01N
審判 全部申し立て 1項3号刊行物記載  G01N
管理番号 1384268
総通号数 5 
発行国 JP 
公報種別 特許決定公報 
発行日 2022-05-27 
種別 異議の決定 
異議申立日 2021-12-08 
確定日 2022-03-09 
異議申立件数 1 
事件の表示 特許第６８８３８９９号発明「血液凝固検査試薬、および血液凝固検査方法」の特許異議申立事件について、次のとおり決定する。 
結論 特許第６８８３８９９号の請求項１ないし４に係る特許を維持する。 
理由 第１ 手続の経緯
特許第６８８３８９９号の請求項１〜４に係る特許についての出願は、令和２年１２月７日に出願され、令和３年５月１３日にその特許権の設定登録がされ、同年６月９日に特許掲載公報が発行された。その後、その特許に対し、令和３年１２月８日に特許異議申立人野崎勝義（以下「申立人」という。）により特許異議の申立てがなされた。

第２ 本件発明
特許第６８８３８９９号の請求項１〜４の特許に係る発明（以下「本件発明１」〜「本件発明４」という。）は、それぞれ、その特許請求の範囲の請求項１〜４に記載された事項により特定されるとおりのものであり、そのうち、本件発明１及び４を記載すると、以下のとおりである。
「【請求項１】活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）と、組織因子（ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ，ＴＦ）と、を含む血液凝固検査試薬。」
「【請求項４】
被験検体である生体試料と、０．５ｐＭ〜１，０００ｐＭの活性型の血液凝固第ＸＩ因子と、１ｆＭ〜１，０００ｆＭの組織因子とを含む検査試薬と、を反応させることで形成するトロンビンの量を測定する工程を有する血液凝固検査方法。」
そして、本件発明２及び３は、本件発明１を引用して、さらに限定を加えた「血液凝固検査試薬」の発明である。

第３ 申立理由の概要
申立人は、主たる証拠として以下の甲第１号証（以下「甲１」という。）を、従たる証拠として以下の甲第２号証及び甲第３号証（以下「甲２」及び「甲３」という。）を提示し、以下の理由により、請求項１〜４に係る特許を取り消すべきものである旨主張する。

（新規性）について
本件発明１〜４は、甲１に記載された発明であり、
特許法第29条第1項第3号に該当するから、請求項１〜４に係る特許は、特許法第29条第1項の規定に違反してされたものである。

（進歩性）について
本件発明１は、甲１に記載された発明、及び甲２に記載された事項に基づいて、
本件発明２は、甲１に記載された発明、及び甲３に記載された事項に基づいて、
本件発明３は、甲１に記載された発明、及び甲３に記載された事項に基づいて、
本件発明４は、甲１に記載された発明、並びに甲２及び甲３に記載された事項に基づいて、
当業者が容易に発明をすることができたものであるから、請求項１〜４に係る特許は、特許法第29条第2項の規定に違反してされたものである。

甲１：特表２０１９−５２１３２４号公報
甲２：M.Ninivaggi et.al.,“Thrombin generation assay using factor IXa as a trigger to quantify accurately factor VIII levels in haemophilia A ”Journal of Thrombosis and Haemostasis, ２０１１年、第９巻、1549-1555頁
甲３：鈴木宏治「血液凝固制御蛋白」日本内科学会雑誌、第８３巻第４号、平成６年４月１０日、126-133頁

第４ 甲号証の記載
１ 甲１について
（１）甲１には、以下の事項が記載されている（なお、下線は当審において付与したものである。以下同様。）。
（甲１ア）「【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液試料中で生成されたトロンビン（ＴＧ）を測定するための高感度で迅速なアッセイであって、
前記血液試料を組織因子（ＴＦ）、ＦＩＸａ、およびＣａＣｌ２と共に５分間までインキュベーションすること；ならびに
Ｈ−Ｄ−シクロヘキシル−アルギニル−アラニル−アルギニル−アミドメチルクマリン（ＡＭＣ）および／またはブチルオキシカルボニル−バリル−プロリニル−アルギニル−ＡＭＣ（Ｖ−Ｐ−Ｒ−ＡＭＣ）を使用することによって、前記血液試料中のＴＧを測定すること
を含むアッセイ。」

（甲１イ）「【発明の概要】
【０００５】
本明細書に開示される様々な実施形態としては、血液試料中の生成トロンビン（ＴＧ）を測定するための高感度で迅速なアッセイが挙げられ、このアッセイは、血液試料を組織因子（ＴＦ）、ＦＩＸａ、およびＣａＣｌ２と共に５分間までインキュベーションすること；およびＨ−Ｄ−シクロヘキシル−アルギニル−アラニル−アルギニル−アミドメチルクマリン（ＡＭＣ）および／またはブチルオキシカルボニル−バリル−プロリニル−アルギニル−ＡＭＣ（Ｖ−Ｐ−Ｒ−ＡＭＣ）を使用することによって、血液試料中のＴＧを測定することを含む。」

（甲１ウ）「【００６８】
様々な実施形態で、本開示はこの課題に対処する。一実施形態では、本明細書の開示は、様々な実験および結果を通じて、ＴＦ凝固経路とＣＰ凝固経路の両方が、マウス頸動脈におけるＦｅＣｌ３誘導性の血栓症に寄与することを確定し、それは、ＴＦ依存的な凝固を８０％阻害するモノクローナル抗体（ＭｏＡｂ）およびＦＸＩＩによるＦＸＩの活性化を遮断するＭｏＡｂが、全て個別に血管の閉塞を阻害したことを示すことによる。別の実施形態では、同様の効果が、閾値下の濃度の２つの抗体を組み合わせることによって得られ、このことは、このモデルで、内在性と外因性の両方の経路が、血栓形成促進性のレベルの凝固プロテアーゼを生成することに一致する。いくつかの実験、すなわち正常血小板を補充してカルシウム再加されたヒトＦＩＸ欠損血漿を用いたｅｘ ｖｉｖｏ実験では、再脂質化された組換えＴＦ（ｒＴＦ）は、個別の不活性な濃度で、ＦＩＸａによるトロンビン生成を相乗的に増強した。一実施形態では、この知見は、観察されたＴＦ経路とＣＰ経路との協働機能が、ＦＩＸを活性化する直接的または間接的なフィードフォワードループの結果ではなかったことを実証する。さらに、正常な血小板に富む血漿（ＰＲＰ）では、ｒＴＦと共に添加されたＦＸＩＩａまたはＦＸＩａは、ＦＩＸａと同じ効果を有し、このことは、ＣＰの活性化が、ＦＩＸａ生成の上流経路であることを実証する。いくつかの実施形態で、ＴＦおよびＣＰの経路の相乗作用は、ＦＶＩＩとＦＶＩＩＩの両方を含み、血漿中に存在する低濃度のＴＦＰＩは、ｒＴＦのみによるトロンビン生成の抑制に関与した。」

（甲１エ）「【００７８】
一実施形態で、正常血小板を補充された血漿（再構成されＰＲＰ）中のトロンビン生成を測定することによって、凝固経路の協働をｉｎ ｖｉｔｒｏで調べた。接触経路プロテアーゼ（ＦＸＩＩａ、ＦＸＩａ、またはＦＩＸａ）をＴＦと共に添加することによって、プロテアーゼまたはＴＦが個別に添加された際よりも多くのトロンビンが産生した。しかし、人工的な接触経路の活性化を阻害するために、正常血漿がＦＸＩＩａ指向性のトウモロコシトリプシン阻害剤（ＣＴＩ）を含有していた際には、低濃度のＴＦのみでは、トロンビンは本質的には産生されなかった。むしろ、ＴＦは、ＦＶＩＩａおよびＦＶＩＩＩの両方を必要とする様式では、ＦＩＸａによるトロンビン産生を相乗的に増大させた。直接的または間接的なループによる追加的なＦＩＸの活性化にＴＦが寄与したことを除けば、同じ相乗効果が、ＦＩＸ欠損血漿に起こり、このことは、生理的な血漿凝固阻害物質の存在下でのＦＩＸａ依存的なトロンビン生成のための実現化ステップとして、ＦＶＩＩＩａ補因子の生成を標示する。」

（甲１オ）「【０１２０】
実施例２４
ヒト血小板に富む血漿（ＰＲＰ）または再構成されたＰＲＰにおけるトロンビン生成
ＰＲＰは、クエン酸三ナトリウム中（終濃度０．０１２９Ｍ）に採集した血液から、２５℃、２５０ｇで１０分間遠心分離することによって調製した。ＰＲＰを１，５００ｇで追加的に１０分間遠心分離することによって得た相同な血小板に乏しい血漿（ＰＰＰ）を用いて希釈することによって、血小板数をμＬ当たり１８０・１０３に調整した。標示されている場合には、ＦＸＩＩａによる阻害により測定して較正された効力を基準に、３０から５０μｇ／ｍＬでＣＴＩを添加した。ＦＶＩＩ、ＦＶＩＩＩ（どちらもＧｅｏｒｇｅ Ｋｉｎｇ Ｂｉｏ−Ｍｅｄｉｃａｌ、オーバーランドパーク、カンザス州から入手）かまたはＦＩＸ（Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を欠いたＰＰＰ（ＣＴＩを含むかまたは含まない）中に、洗浄済みの正常血小板を添加することによって、再構成されたＰＲＰを調製した。ＰＲＰ中のＴＦＩＩａ生成は、Ｈｅｍｋｅｒ ｅｔ ａｌ．に記載されているように測定した。５３μＬのＰＲＰを、９６穴マイクロタイタープレート中、標示された終濃度を達成するようにｒＴＦおよび／または内在性凝固経路プロテアーゼ−ＦＸＩＩａ、ＦＸＩａ、またはＦＩＸａ−のうち１つを含有する１５μＬの溶液と混合した。抗体または阻害剤も、この時点で、各特定の場合について標示された濃度で添加した。１５と２０μＬの間の１００ｍＭ ＣａＣｌ２および２ｍＭ発光発生基質ベンジルオキシカルボニル−グリシル−グリシル−Ｌ−アルギニン−７−アミド−４−メチルクマリン（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ；Ｂａｃｈｅｍ Ａｍｅｒｉｃａｓ、トーランス、カリフォルニア州）を添加することによって、反応を開始した。阻害性の抗ＴＦＰＩポリクローナル抗体または対照のウサギＩｇＧ（２０μｇ／ｍＬ）の存在下、リン脂質ベシクル（５μＭ）を添加したＰＰＰ中での、ＦＩＩａ生成も検討した。反応中に発達した相対蛍光強度を、分光蛍光光度計にて、３７℃で４０分間まで継続的に測定した（励起３５５ｎｍおよび放出４６０ｎｍ）。時間の関数としての蛍光強度速度の増加（ｄＦ／ｄｔ）を、プログラムＴｕｒｂｏ Ｄｅｌｐｈｉ２００６（Ｂｏｒｌａｎｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、オースティン、テキサス州）を用いて算出し、較正曲線を用いてトロンビン当量濃度（ｎＭ）に変換した。ＦＩＩａ生成は、遅延時間（３ｎＭ トロンビンが形成されるまでの時間）および内在性トロンビン生成能（ＥＴＰ；トロンビン生成経時曲線下の面積から決定した総生成トロンビン活性）を決定することによって表現した。」

（甲１カ）「【０１７９】
血液凝固酵素であるトロンビン（ＦＩＩａ）は、安定なフィブリン凝塊を形成することにより、大出血の防止および自然発生の出血の停止（すなわち「止血」）を担うが、その一方で、ＦＩＩａの過剰形成は、心臓発作および脳卒中を含めた致死性の血管の疾患「血栓症」を引き起こすことがある。現在広まっているＦＩＩａ生成（ＴＧ）のスキームでは、組織因子（ＴＦ）と活性の因子（Ｆ）ＶＩＩａとの外因性経路複合体が、タンパク質分解反応のカスケードを開始し、このカスケードは、活性の補因子ＦＶａとともにプロトロンビナーゼ複合体を形成する第１相で、ＦＸａを産生し、初発の少量のＦＩＩａを生成する。初発で生産されたＦＩＩａは、プロトロンビナーゼ複合体の活性を増強することによってＦＩＩａ生成（ＴＧ）を増幅し、第２相の生成ＦＩＩａのバーストに導く。本発明者らは、初発のＦＩＩａがプロトロンビナーゼ複合体の活性を増強することに資する分子機構が、以下の通りであることを発見している。すなわち、１）初発のＦＩＩａが、プロトロンビナーゼ活性に不可欠な活性のリン脂質表面を提供する、血小板の活性化を惹起する；２）ＦＩＩａが、ＦＶをＦＶａへと直接的に活性化することによって、プロトロンビナーゼ複合体の形成を増加させる；３）ＦＩＩａが、内在性のＦＶＩＩＩａ−ＦＩＸａ経路の活性化によって、ＦＸａの生成を促進する、である。ＦＩＩａは、必須の補因子であるＦＶＩＩＩを、プロテアーゼＦＩＸａのための活性のＦＶＩＩＩａへと、直接的に活性化する。さらに、ＦＩＩａは、ＦＩＸをＦＩＸａへと間接的に活性化するが、この活性化は、酵素原ＦＸＩの酵素ＦＸＩａへの活性化によって媒介され、ＦＸＩａは、次いで、ＦＩＸをＦＩＸａへと活性化する。最後に、大量の生成ＦＩＩａは、フィブリノーゲンを、止血および血栓症に不可欠なフィブリンに変換する。このように、最初に生成されるＦＩＩａは、血液凝固の程度の決定要因として機能し、このことは、初発のＴＧを決定することによって、出血障害および血栓性の合併症をさらに正確に査定するための診断のアプローチがもたらされることを示唆する。」

（甲１キ）「【０１９４】
本発明者らは、ＦＩＸからＦＩＸａへの活性化の際にＦＸＩａおよびＴＦ−ＦＶＩＩａを生成するトロンビンフィードバックループの相対的な役割を比較するための、カルシウム再加されたクエン酸添加全血を用いた流れベースのアッセイを本明細書に開示している。この帰結のために、ＦＶＩＩＩａおよびＦＩＸａの活性に依存した凝固の活性化およびフィブリンの沈着をサポートすることが以前に示されている限定濃度のｒＴＦで被覆された表面の上に、１０人の正常な個体から得た血液を灌流した（図１６を参照）。そこでは、灌流中の壁せん断速度を３００ｓ−１で維持した。対照として、トロンビン生成とは独立して血小板の接着および凝集をサポートする線維コラーゲンＩ型の表面に、同じ血液試料を灌流した。トロンビンフィードバックループによるＦＸＩａかまたはＴＦ−ＦＶＩＩａをそれぞれ通じたＦＩＸａ生成を選択的に阻害するための特異的なモノクローナル抗体（ＭｏＡｂ）を用いて、ＦＸＩａおよびＴＦの活性を遮断した。予想通り、コラーゲン表面で、血小板凝集体の体積は、凝固経路を阻害することによる影響を受けなかったのに対して、フィブリンの沈着は、抗ＦＸＩａ ＭｏＡｂによって顕著に減少し、抗ＴＦ ＭｏＡｂによって本質的に影響を受けなかった（図２３Ａ〜Ｂ）。これらの結果は、コラーゲン表面での凝固の活性化が、ＦＸＩＩａ依存的な接触経路を通じたＦＸＩａ生成によって開始されるという見解に一致する。」

（２）甲１発明について
甲１には、上記（甲１ア）及び（甲１イ）の記載から、以下の発明が記載されていると認める。
「血液試料中で生成されたトロンビン（ＴＧ）を測定するための高感度で迅速なアッセイであって、
前記血液試料を組織因子（ＴＦ）、ＦＩＸａ、およびＣａＣｌ２と共に５分間までインキュベーションすること；ならびに
Ｈ−Ｄ−シクロヘキシル−アルギニル−アラニル−アルギニル−アミドメチルクマリン（ＡＭＣ）および／またはブチルオキシカルボニル−バリル−プロリニル−アルギニル−ＡＭＣ（Ｖ−Ｐ−Ｒ−ＡＭＣ）を使用することによって、前記血液試料中のＴＧを測定すること
を含むアッセイ。」（以下「甲１発明」という。）

２ 甲２について
甲２には、以下の事項が記載されている。
（甲２ア）「It is increasingly recognized that the transient thrombin generation profile in clotting plasma is a better indication of the function of the blood coagulation system than the clotting time is [9-11].」（1549頁右欄27〜30行）
（申立人訳参照：凝固血漿中の一過性トロンビン生成プロファイルは、凝固時間よりも血液凝固系の機能のより良い指標であることがますます認識されてきている[9-11]。）

３ 甲３について
甲３には、以下の事項が記載されている。
（甲３ア）「フィブリン血栓は，表１に示す凝固因子の逐次的・増幅的なカスケード反応によって形成される.」（126頁右欄10〜11行）


（甲３イ）「活性化プロテインＣ（ＡＰＣ）は凝固反応の律速因子である補酵素蛋白のＶa因子およびＶIIIa因子を分解・失活化し，凝固反応を制御する（図１参照）．」（129頁右欄12行〜130左欄１行）


第５ 当審の判断
１ 本件発明１について
（１）対比
本件発明１と甲１発明とを対比する。
ア 甲１発明の「ＦＩＸａ」と、本件発明１の「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」とは、「血液凝固因子」という限りにおいて共通する。

イ 甲１発明の「組織因子（ＴＦ）」は、本件発明１の「組織因子（ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ，ＴＦ）」に相当する。

ウ 甲１発明の「血液試料を組織因子（ＴＦ）、ＦＩＸａ、およびＣａＣｌ２と共に５分間までインキュベーションすること」において、インキュベーションするものには、組織因子（ＴＦ）とＦＩＸａが含まれているといえることから、甲１発明の「血液試料を組織因子（ＴＦ）、ＦＩＸａ、およびＣａＣｌ２と共に５分間までインキュベーションする」ものと、本件発明１の「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）と、組織因子（ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ，ＴＦ）と、を含む血液凝固検査試薬」とは、上記ア及びイを踏まえると、「血液凝固因子と、組織因子（ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ，ＴＦ）と、を含むもの」という限りにおいて共通する。

エ したがって、本件発明１と甲１発明とは、以下の点で一致し、以下の点で相違する。
（一致点）
「血液凝固因子と、組織因子（ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ，ＴＦ）と、を含むもの」

（相違点）
本件発明１は、血液凝固因子が「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」である「血液凝固検査試薬」であるのに対し、
甲１発明は、血液凝固因子が「ＦＩＸａ」であり、「血液凝固検査試薬」として特定されていない点。

（２）判断
ア 相違点の判断
（ア）血液凝固検査試薬について
血液凝固検査試薬とは、対象（患者）の血液の凝固する活性を検査するための試薬のことであり、本件明細書には、その背景技術及び課題として、以下のように記載されている。
「【０００８】
血栓症は主に、血液凝固反応を抑制することで過剰なトロンビン形成を防止する抗凝固薬によって治療される。近年、ＦＸａをターゲットにしてトロンビン形成を阻害する直接経口抗凝固薬（Ｄｉｒｅｃｔ Ｏｒａｌ Ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔｓ：ＤＯＡＣｓ）が開発され、脳梗塞患者などを対象にして広く使用されるようになった。従来のワーファリンやヘパリンを用いた治療の場合には、出血や血栓症の再発などの副作用の出現を最小限にするために、投薬後に薬の効果を血液凝固検査によってモニタリングし、得られる検査結果をもとに投与量を最適化してきた。
【０００９】
実際にワーファリン治療の場合にはプロトロンビン時間検査（ＰＴ−ＩＮＲ）、ヘパリン治療においては活性化部分トロンボプラスチン時間検査（ＡＰＴＴ）が用いられている。一方ＤＯＡＣｓの場合は、当初、投薬後の薬の血液中の半減期が短くコントロールしやすいこと、また副作用の少ない安全な薬と考えられていたことから、モニタリング検査は行われていなかった。【００１０】 しかし、ＤＯＡＣｓを服用する患者が増加するに伴い、高齢者や腎機能の低下した患者を中心にして投薬後に過剰な出血を引き起こす例が多数報告されるようになった。こうした出血は患者の生活の質を低下させ、最悪死に至らしめるだけでなく、医療経済上も大きな費用負担となる。出血リスクを低減させたより安全なＤＯＡＣｓ治療の開発が喫緊の課題となっている。
【００１１】
抗血栓療法等に関するものとして、例えば、特許文献１は、血液試料中で生成されたトロンビン（ＴＧ）を測定するための高感度で迅速なアッセイであって、前記血液試料を組織因子（ＴＦ）、ＦＩＸａ、およびＣａＣｌ2と共に５分間までインキュベーションすること；ならびにＨ−Ｄ−シクロヘキシル−アルギニル−アラニル−アルギニル−アミドメチルクマリン（ＡＭＣ）および／またはブチルオキシカルボニル−バリル−プロリニル−アルギニル−ＡＭＣ（Ｖ−Ｐ−Ｒ−ＡＭＣ）を使用することによって、前記血液試料中のＴＧを測定することを含むアッセイ等を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特表２０１９−５２１３２４号公報」
「【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
現在の治療ガイドラインにおいては、同じ血栓症の患者は同一量のＤＯＡＣｓで治療される。従って、薬に対する患者の感受性や反応性の違いは考慮されない。出血した患者においては、薬が効きすぎて血液凝固活性が著しく低下し、止血機能を失った可能性が考えられる。
【００１５】
このように、ＤＯＡＣｓを用いた治療においても薬の効果をモニタリングし、患者毎に薬の使用量を適正化する個別化治療が望まれている。しかし現状では、プロトロンビン（ＰＴ−ＩＮＲ）や活性化部分トロンボプラスチン時間検査（ＡＰＴＴ）などの従来の血液凝固検査は、その検出感度が低く、ＤＯＡＣｓの効果を正確に評価できないことから、未だその実現には至っていない。係る状況下、本発明者らは、様々な出血性疾患の治療を行うにあたって、出血のリスクの正確な判定や評価に適した高感度の血液凝固検査法を鋭意検討した。
【００１６】
本発明は、新たな血液凝固検査試薬や血液凝固検査方法を提供することを目的とする。」

なお、上記特許文献１（特表２０１９−５２１３２４号公報）とは、甲１のことである。

（イ）甲１の記載事項について
ａ 一方、甲１には、「血液凝固検査試薬」との記載はないものの、上記第４の１の（甲１ウ）〜（甲１キ）で摘記したとおり、「血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」に関する記載は存在することから、それらの記載について検討する。
（甲１ウ）の記載について
（甲１ウ）には「一実施形態では、この知見は、観察されたＴＦ経路とＣＰ経路との協働機能が、ＦＩＸを活性化する直接的または間接的なフィードフォワードループの結果ではなかったことを実証する。さらに、正常な血小板に富む血漿（ＰＲＰ）では、ｒＴＦと共に添加されたＦＸＩＩａまたはＦＸＩａは、ＦＩＸａと同じ効果を有し、このことは、ＣＰの活性化が、ＦＩＸａ生成の上流経路であることを実証する。いくつかの実施形態で、ＴＦおよびＣＰの経路の相乗作用は、ＦＶＩＩとＦＶＩＩＩの両方を含み、血漿中に存在する低濃度のＴＦＰＩは、ｒＴＦのみによるトロンビン生成の抑制に関与した。」と、「ｒＴＦと共に添加されたＦＸＩＩａまたはＦＸＩａは、ＦＩＸａと同じ効果を有」るとの記載はあるものの、それは、ＣＰの活性化がＦＩＸａ生成の上流経路であることからＦＸＩａがＦＩＸａと同じ効果を有していることを示しているものであって、「血液凝固検査試薬」として同じ効果があることを示唆しているわけではないから、「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆しているとまではいえない。

（甲１エ）の記載について
（甲１エ）には、「接触経路プロテアーゼ（ＦＸＩＩａ、ＦＸＩａ、またはＦＩＸａ）をＴＦと共に添加することによって、プロテアーゼまたはＴＦが個別に添加された際よりも多くのトロンビンが産生した。しかし、人工的な接触経路の活性化を阻害するために、正常血漿がＦＸＩＩａ指向性のトウモロコシトリプシン阻害剤（ＣＴＩ）を含有していた際には、低濃度のＴＦのみでは、トロンビンは本質的には産生されなかった。むしろ、ＴＦは、ＦＶＩＩａおよびＦＶＩＩＩの両方を必要とする様式では、ＦＩＸａによるトロンビン産生を相乗的に増大させた。」と、「接触経路プロテアーゼ（ＦＸＩＩａ、ＦＸＩａ、またはＦＩＸａ）をＴＦと共に添加する」との記載はあるものの、それは、プロテアーゼまたはＴＦが個別に添加された際よりも多くのトロンビンが産生することを示しているにすぎず、「ＦＩＸａによるトロンビン産生を相乗的に増大させた」との記載もあり、「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆しているとまではいえない。

（甲１オ）の記載について
（甲１オ）には「ＰＲＰ中のＴＦＩＩａ生成は、Ｈｅｍｋｅｒ ｅｔ ａｌ．に記載されているように測定した。５３μＬのＰＲＰを、９６穴マイクロタイタープレート中、標示された終濃度を達成するようにｒＴＦおよび／または内在性凝固経路プロテアーゼ−ＦＸＩＩａ、ＦＸＩａ、またはＦＩＸａ−のうち１つを含有する１５μＬの溶液と混合した。」、「ＦＩＩａ生成は、遅延時間（３ｎＭ トロンビンが形成されるまでの時間）および内在性トロンビン生成能（ＥＴＰ；トロンビン生成経時曲線下の面積から決定した総生成トロンビン活性）を決定することによって表現した。」との記載はあるものの、それは、ＦＸＩＩａ、ＦＸＩａ、またはＦＩＸａ−のうち１つでＦＩＩａ生成を測定することを示しているにすぎず、「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆しているとまではいえない。

（甲１カ）の記載について
（甲１カ）には、「ＦＩＩａは、必須の補因子であるＦＶＩＩＩを、プロテアーゼＦＩＸａのための活性のＦＶＩＩＩａへと、直接的に活性化する。さらに、ＦＩＩａは、ＦＩＸをＦＩＸａへと間接的に活性化するが、この活性化は、酵素原ＦＸＩの酵素ＦＸＩａへの活性化によって媒介され、ＦＸＩａは、次いで、ＦＩＸをＦＩＸａへと活性化する。最後に、大量の生成ＦＩＩａは、フィブリノーゲンを、止血および血栓症に不可欠なフィブリンに変換する。」との記載はあるものの、それは、「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆しているとまではいえない。

（甲１キ）について
（甲１キ）には、「トロンビンフィードバックループによるＦＸＩａかまたはＴＦ−ＦＶＩＩａをそれぞれ通じたＦＩＸａ生成を選択的に阻害するための特異的なモノクローナル抗体（ＭｏＡｂ）を用いて、ＦＸＩａおよびＴＦの活性を遮断した。予想通り、コラーゲン表面で、血小板凝集体の体積は、凝固経路を阻害することによる影響を受けなかったのに対して、フィブリンの沈着は、抗ＦＸＩａ ＭｏＡｂによって顕著に減少し、抗ＴＦ ＭｏＡｂによって本質的に影響を受けなかった（図２３Ａ〜Ｂ）。これらの結果は、コラーゲン表面での凝固の活性化が、ＦＸＩＩａ依存的な接触経路を通じたＦＸＩａ生成によって開始されるという見解に一致する。」との記載はあるものの、それは、「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆しているとまではいえない。

ｂ 小括
よって、甲１には、「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆する記載はないことから、上記相違点は、甲１の記載事項に基づいて当業者が容易になし得たものとはいえない。

（ウ）甲２及び甲３の記載事項について
上記第４の２及び３で摘記した（甲２ア）並びに（甲３ア）及び（甲３イ）は、いずれも「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆するものではないことから、上記相違点は、甲２及び甲３の記載事項に基づいて当業者が容易になし得たものとはいえない。

イ 効果について
（ア）本件明細書には、「血液凝固検査試薬」として「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いたことによる効果について、以下のように記載されている。
「【００２８】
本発明の検査試薬や本発明の検査方法は、活性型の血液凝固第ＩＸ因子（ＦＩＸａ）を用いる場合よりも、高感度な検査ができる。このため、使用する試薬量も、少量で行うことができる。活性型の血液凝固第ＸＩ因子や組織因子は、生体由来等で大量製造が難しいことから、少量でも試験ができる本発明は有用である。また、繰り返し試験なども行いやすいため、試験回数の増加にも適している。
【００２９】
また、血栓症を防ぐためにＦＩＸａを低下させる治療法や、ＦＩＸが欠落している血友病Ｂなどのように、ＦＩＸａによる検査が適さないような場合も、本発明による検査は可能であり、本発明は、血液凝固の検査手法の多様化にも貢献する。」

そして、実施例において、甲１（特表２０１９−５２１３２４号公報）に対して、以下の実験結果が記載されている。
「【００７９】
４）実施例４：ａｐｉｘａｂａｎの服用後ピーク時に採血して得た血漿中のトロンビン形成と出血イベントとの関連
トロンビン形成と出血イベントとの関連を調べるために、ａｐｉｘａｂａｎを服用した患者を出血した患者群（検体数：６）と非出血患者群（検体数：８３）に分けて、本発明による検査試薬を用いて血漿中のトロンビン形成を比較した。トロンビン形成を開始させる混合試薬は図３と同じ試薬を用いた。加えて、特表２０１９−５２１３２４号公報に記載の混合開始薬（ＴＦを１５０ｆＭ、ＦIＸａを１００ｐＭ、合成リン脂質を２０μＭ、塩化カルシウムを１６ｍＭ）を用いて血漿中のトロンビン形成を比較した。その他、血漿中のａｐｉｘａｂａｎ濃度、ＡＰＴＴ及びＰＴ−ＩＮＲで測定した凝固活性値についても同様に比較した。血漿検体はａｐｉｘａｂａｎを服用後１時間から４時間の間（ピーク時）に採血して調製した。
【００８０】
本発明によって得られた検査結果において、出血した患者群から調製した血漿中のトロンビン形成は非出血群に比べて有意に低かった（図５のパネルＡ。Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ統計解析によりｐ＜０．０５）。対照的に、特表２０１９−５２１３２４号公報に記載のＴＦとＦＩＸａを用いたトロンビン形成結果（図５のパネルＢ）、ａｐｉｘａｂａｎ濃度（図５のパネルＣ）、ＡＰＴＴ（図５のパネルＤ）及びＰＴ−ＩＮＲ（図５のパネルＥ）による凝固活性値は、両群間に有意な差は見られなかった。以上の結果は、当該のトロンビン形成試験のみがａｐｉｘａｂａｎの服用によって引き起こされる出血のリスクを判定できることを示していた。
【００８１】
図５は、Ａｐｉｘａｂａｎ服用後ピーク時に採血して得た血漿中の血液凝固パラメーターと出血イベントとの関連を示す図である。Ａｐｉｘａｂａｎを服用した患者を出血した患者群（ｎ＝６）と非出血患者群（ｎ＝８３）に分けて血漿中の血液凝固パラメーターを比較した。血漿検体はａｐｉｘａｂａｎを服用後１時間から４時間の間（ピーク時）に採血して調製した。トロンビン形成を開始させる混合試薬は図３と同じ試薬を用いた。
Ａ．本発明によるトロンビン形成値。
Ｂ．特表２０１９−５２１３２４号公報に記載のＴＦとＦＩＸａを用いた検査によるトロンビン形成値」
上記図５として、ＡとＢ、すなわち、本件発明１の「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いた結果を示すＡと甲１の「ＦＩＸａ」を用いた結果を示すＢを以下に示す。


（イ）効果についての判断
本件明細書には、血漿中のトロンビン形成について、血液凝固因子として甲１発明の「ＦＩＸａ」を用いると、出血した患者群と非出血の患者群とで有意な差が見られない場合であっても、本件発明１の「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いると、両者の群を有意に区別することができることが記載されており、当該効果は、甲１の記載から、さらには甲２及び３の記載から、当業者といえども予期し得るものではない。

ウ 申立人の主張について
（ア）申立人は、上記第３で記載した本件発明１に対する申立理由について、特許異議申立書において、以下の主張している。
ａ 「これらをまとめると、甲第１号証には以下の発明（以下、甲１発明）が記載されている。
Ａ 活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）と、
Ｂ 組織因子（ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ，ＴＦ）と、
Ｃ を含む血液凝固検査試薬。」

ｂ 「甲１発明の実施において、必然的にＦＸＩａが関与していることは当業者にとって明らかであり、ＦＩＸａをＦＩＸａ（当審注：ＦＸＩａの誤記といえる）と置換することは、当業者によって容易に想到し得る。」

ｃ 「本件特許発明１は、血液凝固検査試薬に関するものであるが、甲１発明が直接この記載を用いていないとしたとしても、上述の甲第２号証に記載されているように、トロンビン生成が、血液凝固の指標であることが、本件特許の出願日前において、当業者の技術常識であることから、甲１発明には、血液凝固検査試薬を記載しているといえる。」

（イ）申立人の主張に対する当審の判断
ａについて
「これらをまとめる」の「これら」とは、上記第４の１で摘記した甲１の記載であるところ、上記（甲１ア）〜（甲１キ）を「まとめ」ても、「Ａ 活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）と」「Ｃ を含む血液凝固検査試薬。」を認定できず、申立人の甲１発明の認定は、本件発明１を見たうえでのものにすぎない。

ｂについて
申立人は、「甲１発明の実施において、・・・、ＦＩＸａをＦＸＩａと置換することは、当業者によって容易に想到し得る。」としているが、申立人は甲１発明を上記（ア）ａのとおり「ＦＸＩａ」を含むものとして認定しているから、「甲１発明の実施においてＦＩＸａをＦＸＩａと置換する」とは意味不明である。
また、仮に、申立人の甲１発明の認定が「ＦＩＸａ」を含むものとしての認定だとしても、上記ア（イ）で述べたように、血液凝固検査試薬とすべく「ＦＩＸａをＦＸＩａと置換すること」が容易であったともいえない。

ｃについて
上記甲２の記載から、トロンビン生成が血液凝固の指標になることはいえても、甲２は、上記ア（ウ）で述べたように、「血液凝固検査試薬」とすべく「ＦＩＸａ」に替えて「活性型の血液凝固第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）」を用いることを示唆するものではない。

ｄ 上記イで述べたとおり、本件明細書では、その実施例において、本件発明１と甲１についてトロンビン形成に関する実験結果を記載し、それらの比較検討の結果を示したうえで本件発明１の効果を記載しているところ、申立人は、その効果について何ら検討していない。
発明の奏する効果が当業者といえども予期し得ない以上、発明の進歩性を否定することはできないことから、本件発明１について進歩性を否定することはできない。

（３）まとめ
したがって、本件発明１は、甲１発明ではなく、そして、甲１発明及び甲１ないし甲３の記載事項から当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

２ 本件発明２及び３について
本件発明２及び３は、上記第２で記載したように、本件発明１を引用して、さらに限定を加えた「血液凝固検査試薬」の発明であることから、本件発明２及び３についても、甲１発明ではなく、そして、甲１発明及び甲１ないし甲３の記載事項から当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

３ 本件発明４について
本件発明４は、上記第２で記載したように「血液凝固検査方法」の発明であるところ、その発明特定事項の「・・・の活性型の血液凝固第ＸＩ因子と、・・・の組織因子とを含む検査試薬と、・・・を有する血液凝固検査」である点において、本件発明１と共通するものである。
そして、その共通事項の点で、本件発明１が、甲１発明ではなく、甲１発明及び甲１ないし甲３の記載事項から当業者が容易に発明をすることができたものではないことから、本件発明４についても、甲１発明ではなく、そして、甲１発明及び甲１ないし甲３の記載事項から当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。

第６ むすび
以上のとおり、本件発明１〜４は、甲１発明ではなく、特許法第29条第1項第3号に該当しないことから、特許法第29条第1項の規定に違反してされたものではなく、そして、甲１発明及び甲１ないし甲３の記載事項から当業者が容易に発明をすることができたものではないことから、特許法第29条第2項の規定に違反してされたものでもない。
したがって、特許異議の申立ての理由及び証拠によっては、請求項１〜４に係る特許を取り消すことはできない。
また、他に請求項１〜４に係る特許を取り消すべき理由を発見しない。
よって、結論のとおり決定する。
 
異議決定日 2022-02-25 
出願番号 P2020-202843
審決分類 P 1 651・ 121- Y (G01N)
P 1 651・ 113- Y (G01N)
最終処分 07   維持
特許庁審判長 福島 浩司
特許庁審判官 ▲高▼見 重雄
三崎 仁
登録日 2021-05-13 
登録番号 6883899
権利者 株式会社血栓トランスレーショナルリサーチラボ
発明の名称 血液凝固検査試薬、および血液凝固検査方法  
代理人 遠坂 啓太  
代理人 南瀬 透  
代理人 加藤 久  

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